[發明專利]一種HPLC測定血漿中腐植酸鈉檢測方法

有效

• 申請號: 202111085487.4
• 申請日: 2021-09-16
• 公開（公告）號: CN113686996B
• 公開（公告）日: 2023-02-24
• 發明（設計）人: 請求不公布姓名
• 申請（專利權）人: 阜陽市天行醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種血漿中腐植酸鈉的檢測方法，其檢測過程所需器具材料如下：Waters e2695高效液相色譜儀，電子天平，量瓶，稀釋劑，流動相，腐植酸鈉水溶液，乙腈；其檢測步驟為：S1、取樣，S2、血漿制備，S3、建立色譜條件，S4、色譜實驗，S5、專屬實驗。本發明通過改變流動相和色譜條件進行高效液相色譜分析實驗，建立了血漿中腐植酸鈉的檢測方法。該方法操作簡便，結果準確，可用于血漿中腐植酸鈉的測定，對于實現腐植酸鈉外用制劑在動物實驗中、安全性保證具有極其重要的意義。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，更具體地說，尤其涉及一種腐植酸鈉。同時，本發明還涉及一種腐植酸鈉外用制劑動物實驗方法。

背景技術

腐植酸鈉是以風化煤、泥炭和褐煤為原料經特殊工藝加工制成的一種具有多種功能的大分子有機弱酸鈉鹽，其結構比較復雜。腐植酸鈉具有膠體特性和吸附能力，形成良好的離子交換和催化作用，有效改善胃腸功能，促進胃液分泌;刺激胃腸道有益菌生長，抑制腐敗菌繁殖。腐植酸鈉中的羥基具有沉淀蛋白質的作用，從而達到止血的效果;高分子化合物吸附在沉積的血小板之間，增強血液凝膠的強度，屬于復合止血;羰基參與氧化還原過程，使新陳代謝旺盛，促進細胞增殖，加速生長，使大部分壞死組織和壞死骨骼脫落，萎縮或愈合，從而達到去壞死組織生肌的效果。

發明內容

本發明的目的在于提供一種HPLC測定血漿中腐植酸鈉檢測方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種HPLC測定血漿中腐植酸鈉檢測方法，其檢測過程所需器具材料如下：Waterse2695高效液相色譜儀，電子天平，量瓶，稀釋劑，流動相，腐植酸鈉水溶液，乙腈。

優選的，所述流動相是由乙腈-含0.1％乙酸的水溶液 以90∶10的比例混合制成。

優選的，所述稀釋劑為乙腈或乙腈水溶液。

優選的，該檢測方法包括如下步驟：

S1、取樣；

S2、建立色譜條件：色譜參數包括Shim-pack C18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)，柱溫：40 ℃，檢測波長：292 nm，流速：1.0mL/min，流動相：乙腈-含0.1％乙酸血漿用10%乙腈水溶液稀釋5倍，備用的水溶液 以90∶10，進樣量：20μL；

S3、色譜實驗：按上述色譜條件進行高效液相色譜分析，結果腐植酸鈉出峰時間為20min-25min之間；

S4、專屬實驗：用電子天平精密稱取腐植酸鈉17mg，置于50 mL量瓶中，加水30mL，超聲 30 min，冷卻至室溫，在上述色譜條件下進行測定，記錄色譜圖，分析腐植酸鈉出峰時間。

優選的，S2中流動相的流速為0.5-1.5ml/min。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明通過改變流動相和色譜條件進行高效液相色譜分析實驗，建立了血漿中腐植酸鈉的檢測方法。該方法操作簡便，結果準確，可用于腐植酸鈉外用制劑在動物實驗中是否進入血液進行判斷，對于實現對腐植酸鈉外用制劑安全性保證具有極其重要的意義。

附圖說明

了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

附圖1為采用本發明方法檢測空白溶液的液相色譜圖；

附圖2為采用本發明方法檢測對照品溶液的定位色譜圖；

附圖3為制劑組血漿檢測與腐植酸鈉定位比較的色譜圖；