[發明專利]抗CA724抗體或其抗原結合片段及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202111069682.8
• 申請日: 2021-09-13
• 公開（公告）號: CN113880948B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 廉倩倩;徐海偉;常立峻;簡·馬克·玖塞夫·杜加
• 申請（專利權）人: 蘇州長光華醫生物醫學工程有限公司
• 主分類號: C07K16/30
• 分類號: C07K16/30;C12N15/13;C12N1/19;C12N5/10;G01N33/574;C12R1/645
• 代理公司: 蘇州知途知識產權代理事務所(普通合伙) 32299
• 代理人: 馬剛強

本申請涉及一種新的抗CA724抗體，所述抗體能夠很好地識別CA724，并具有高親和力和特異性。所述抗體具有良好的穩定性，能夠用于制備診斷癌癥的診斷劑或檢測CA724的產品，為CA724檢測提供了一種新的選擇。

技術領域

本申請屬于免疫技術領域，尤其涉及抗CA724抗體或其抗原結合片段及其制備方法和應用。

背景技術

CA724是近幾年臨床常用的一個腫瘤指標，主要用于消化道腫瘤的早期篩查，屬于非特異性腫瘤標志物。其本質是細胞表面黏蛋白類的高分子糖蛋白，廣泛分布于上皮細胞和惡性腫瘤的細胞質內，相對分子質量為(220-400)×10³，可被cc49和B72.3兩種單克隆抗體識別。CA724是構成腫瘤細胞骨架成分的重要分子結構，分子結構中含有磷酸化的氨基酸序列，隨著腫瘤細胞的異常增殖，可通過外分泌的方式釋放入血液循環，正常人體血清中CA7246U/mL，當組織發生癌變，則可迅速入血，血清檢測水平急劇升高。因此，CA724又屬于癌胚抗原性質腫瘤標志物。

目前，研究中所提供的有關CA724的檢測方法主要是電化學發光法，檢測儀器多源自羅氏Elecsys1010、2010、170和601免疫測定分析儀。目前多采用cc49和B72.3兩種單克隆抗體檢測CA724，后者是 CA724的特異性抗體，利用抗原抗體夾心法的原理，對CA724水平進行檢測。

胃癌的檢測目前沒有一個特異性的腫瘤指標，需依靠病理和手術進行診斷。CA724是現有與胃癌相關性最高的一個指標。CA724在胃癌患者中血清水平遠遠大于胃部良性病變患者和健康人群，對胃癌有較大的診斷參考價值。CA724對胃癌診斷特異度優于其他指標，如 CA199和CEA等。CA724在卵巢癌、非小細胞肺癌患者血清中水平也呈明顯升高，同時對于肝癌和結直腸癌份的分級診斷有較大的參考價值。因此，對CA724的檢測有較大的臨床意義。

目前國內用于檢測CA724的單克隆抗體基本自外國采購，靈敏度、特異性上都存在缺陷，因此，有需要提供更多的CA724單克隆抗體。

發明內容

為解決現有技術中CA724抗體可選擇性不夠、靈敏度和特異性上存在缺陷的問題，本發明提供一方面提供了一種抗CA724抗體或其抗原結合片段，其特征在于：所述抗體或其抗原結合片段具有至少一個選自SEQ ID NO：1、2、3的重鏈CDR結構域和/或至少一個選自SEQ ID NO：4、5、6的輕鏈CDR結構域。

在一個實施方案中，本發明的抗CA724抗體或其抗原結合片段，其特征在于，所述抗體的重鏈可變區包括以下三個互補決定區CDR： SEQ ID NO:1所示的CDR1，SEQ ID NO:2所示的CDR2，和SEQ ID NO:3 所示的CDR3；所述抗體的輕鏈可變區包括以下三個互補決定區CDR： SEQ ID NO:4所示的CDR1'，SEQ ID NO:5所示的CDR2'，和SEQ ID NO: 6所示的CDR3'。

在一個實施方案中，本發明所述的抗CA724抗體或其抗原結合片段，其特征在于，所述抗體的重鏈包含4個FR區，其中至少一個FR 區的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：7、8、9或10所示的氨基酸序列或者與SEQ ID NO：7、8、9或10具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同源性的序列；所述抗體的輕鏈包含4個FR區，其中至少一個FR區的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：11、12、13或 14所示的氨基酸序列或者與SEQ ID NO：11、12、13或14具有至少 80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同源性的序列。

在一個實施方案中，本發明的抗CA724抗體或其抗原結合片段，其特征在于，所述抗體的重鏈可變區具有如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列；所述抗體的輕鏈可變區具有如SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。