[發明專利]一種去除靜注人免疫球蛋白中抗A、抗A血凝素的親和層析用緩沖液及其用途

有效

• 申請號: 202111056714.0
• 申請日: 2021-09-09
• 公開（公告）號: CN113717281B
• 公開（公告）日: 2023-02-10
• 發明（設計）人: 李偉;梁洪;余鼎;盧楊利;王焰;李澤林
• 申請（專利權）人: 成都蓉生藥業有限責任公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00;C07K1/22
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 張娟;魏靜

1.一種去除靜注人免疫球蛋白中的抗A血凝素和抗B血凝素的的方法，其特征在于：所述方法包括如下步驟：

（1）、取血漿，分離出組分I+II+III，對組分I+II+III進行預純化，然后用兩步離子交換層析法提純，得親和層析待上柱樣品；

（2）、采用預平衡緩沖液洗親和層析柱；所述預平衡緩沖液的用量為3倍柱體積以上，預平衡緩沖液的流速為50～300cm/h；采用平衡緩沖液沖洗親和層析柱，將步驟（1）得到的親和層析待上柱樣品上親和層析柱，收集流穿液；

（3）、將步驟（2）得到的流穿液經低pH孵放、納米過濾、超濾，即得；

步驟（2）中，所述預平衡緩沖液由300~500mM的醋酸鹽水溶液組成，所述醋酸鹽水溶液的pH值為4.0~8.0，所述醋酸鹽為醋酸鈉；所述平衡緩沖液由醋酸鹽水溶液組成，醋酸鹽水溶液中醋酸鹽的濃度為100mM，所述醋酸鹽水溶液的pH值為5.5；所述親和層析柱的填料為Eshmuno? P anti-A和Eshmuno? P anti-B凝膠。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述組分I+II+III是通過低溫乙醇法分離獲得的；所述預純化的方法為：向組分I+II+III中加水溶解，加入辛酸鈉進行沉淀，過濾，保留液體；所述兩步離子交換層析法提純的操作為：將預純化所得液體經第一步陰離子交換層析，收集第一步流穿液，再將第一步流穿液經第二步陰離子交換層析，收集第二步流穿液，即得親和層析待上柱樣品；所述第一步陰離子交換層析的填料為Q基團凝膠，所述第二步陰離子交換層析的填料為Q基團凝膠；

步驟（2）中，所述平衡緩沖液的用量為5倍柱體積以上，平衡緩沖液的流速為50～300cm/h；所述待上柱樣品的流速為20~300cm/h。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述Eshmuno? P anti-A和 Eshmuno? Panti-B凝膠的質量比為1：1；所述預平衡緩沖液的用量為3倍柱體積，預平衡緩沖液的流速為200cm/h；所述平衡緩沖液的流速為200cm/h，待上柱樣品的流速為200cm/h。