[發明專利]含βARKct的脂質體復合物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111042721.5
• 申請日: 2021-09-07
• 公開（公告）號: CN114053224A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 譚琦;李娜;楊明
• 申請（專利權）人: 山東第一醫科大學附屬省立醫院（山東省立醫院）
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/36;A61K48/00;A61P9/10;A61P9/00;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 濟南日新專利代理事務所(普通合伙) 37224
• 代理人: 劉亞寧

1.含βARKct的脂質體復合物，其特征在于，其包括以下組分：含有βARKct的質粒和兩親性羧甲基葡聚糖脂質體；

兩親性羧甲基葡聚糖脂質體和含有βARKct的質粒的質量比為20-30:1。

2.根據權利要求1所述的含βARKct的脂質體復合物，其特征在于，兩親性羧甲基葡聚糖脂質體和含有βARKct的質粒的質量比為25-28:1。

3.根據權利要求1或2所述的脂質體復合物，其特征在于，含有βARKct的質粒由βARKct基因與pcDNA或腺病毒質粒重組得到。

4.權利要求1-3任一項所述含βARKct的脂質體復合物的制備方法，其特征在于，包括一些步驟：

將含有βARKct的質粒溶于DMEM中，按比例加入兩親性羧甲基葡聚糖脂質體，進行超聲水化、過濾，即得。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述兩親性羧甲基葡聚糖脂質體的制備方法，包括以下步驟：以葡聚糖為原料，與含溴乙酸的NaOH溶液反應得羧甲基葡聚糖，將羧甲基葡聚糖、氯化鋰加入二甲基甲酰胺中，加熱溶解后，進行冷卻，加入EDC、NHS，進行EDC/NHS反應，得A液；將溶解有油胺的二甲基甲酰胺溶液滴入到A液中，攪拌、反應12-36h，得兩親性羧甲基葡聚糖；將磷脂、膽固醇、兩親性羧甲基葡聚糖溶于氯仿、甲醇混合溶劑中，進行旋蒸、干燥后，收集形成的磷脂膜，加入PBS緩沖溶液進行水化，將水化后溶液進行過濾，即得。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，磷脂、膽固醇、兩親性羧甲基葡聚糖的摩爾比為：45-55:35-45:0.1-1。

7.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，旋蒸時，在35-40℃恒溫水浴箱旋轉蒸發1-5h；干燥時，先通氮氣進行干燥，去除殘余有機溶劑，然后真空干燥3-6h。

8.根據權利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，所述過濾方法為：采用0.15-0.25μm的濾膜進行過濾。

9.權利要求1-3任一項所述的含βARKct的脂質體復合物在制備治療心肌組織缺血再灌注損傷中藥物中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，治療心肌組織缺血再灌注損傷包括以下任一個或幾個方面：

1)提高心肌收縮力，增強心功能；

2)保護心肌組織的形態和結構；

3)提高能量代謝通路，保護SERCA2a/RyR鈣離子通路，抑制心肌組織過度凋亡的進程；

4)調控腎上腺激素水平的分泌，增強βAR的密度和敏感性，下調GRK2的蛋白表達；

5)對缺氧再復氧模型具有保護作用；

6)通過降低凋亡相關蛋白Foxo1、Caspase3的表達，調控p-Foxo1、LC3-II的表達；

7)通過減少缺氧再復氧心肌細胞模型中凋亡的情況，對心肌細胞起到保護的作用。