[發(fā)明專利]一種強化微生物降解多環(huán)芳烴的方法及微生物菌劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111042043.2
• 申請日: 2021-09-07
• 公開（公告）號: CN113577637B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王芳;王紫泉;曾軍;生弘杰;相雷雷;卞永榮;蔣新
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學院南京土壤研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/20
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務(wù)所 32346
• 代理人: 王玉姣;陳彬

1.一種強化微生物降解多環(huán)芳烴的方法，其特征在于，包括將微生物接種于陽離子改性蒙脫土的步驟；所述微生物為分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCC 1.10964；

所述陽離子改性蒙脫土包括Fe(III)、Co(II)或Na(I)改性蒙脫土中的一種；

所述多環(huán)芳烴為芘；

包括以下步驟：

S1采用滅菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)擴繁分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1，隨后調(diào)整菌密度為OD600＝0.30；

S2向陽離子改性蒙脫土中加入滅菌無機鹽培養(yǎng)基，所述改性蒙脫土與無機鹽培養(yǎng)基固液質(zhì)量比為1:20～1:100；隨后接種步驟S1所述分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1，分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1菌株接種稀釋后OD600不小于0.03；

S3將接種菌后的陽離子改性蒙脫土與含有多環(huán)芳烴的污染物在適宜條件下混合培養(yǎng)，降解多環(huán)芳烴；

或

S1采用陽離子改性蒙脫土吸附固定含有多環(huán)芳烴的污染物；

S2采用滅菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)擴繁分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1，調(diào)整菌密度為OD600＝0.30；

S3向吸附有污染物的陽離子改性蒙脫土中加入滅菌無機鹽培養(yǎng)基，所述改性蒙脫土與無機鹽培養(yǎng)基固液質(zhì)量比為1:20～1:100；隨后接種步驟S2所述分枝桿菌(Mycobacteriumsp.)NJS-1，分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1菌株接種稀釋后OD600不小于0.03；在適宜條件下混合培養(yǎng)，降解多環(huán)芳烴；

所述陽離子改性蒙脫土通過離子交換法制備，具體包括：

a)蒙脫土與金屬陽離子的氯化物溶液固液比為1:20；

b)金屬陽離子當量濃度為0.1N；

c)采用離子交換法，交換次數(shù)不小于2次；

d)每次交換震蕩平衡時間不小于2h；

e)交換完成后，用超純水清洗4次以上直至無Cl^-。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的強化微生物降解多環(huán)芳烴的方法，其特征在于，所述分枝桿菌(Mycobacterium sp.)NJS-1擴繁條件包括：好氧培養(yǎng)，在滅菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中接種適量菌液，在28℃和160rpm避光條件下培養(yǎng)過夜；用滅菌pH7.0 0.1M磷酸鹽緩沖液清洗兩次，調(diào)整菌密度。