[發明專利]一種胎盤中提取分離羊膜干的方法

在審

• 申請號: 202111041186.1
• 申請日: 2021-09-07
• 公開（公告）號: CN114085806A
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 肖揚;杏勇;白亞平
• 申請（專利權）人: 保生貝爾（廈門）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073
• 代理公司: 天津垠坤知識產權代理有限公司 12248
• 代理人: 王忠瑋;趙玉琴

本發明公開了一種胎盤中提取分離羊膜干的方法，包括如下步驟：A：將羊膜和胎盤進行處理，然后對羊膜進行清洗；A1：首先將胎盤固定于機械上，對羊膜與胎盤進行剝離；A2：然后通過清洗水對羊膜進行清洗，祛除血液和殘片，B：羊膜分塊；B1：將羊膜組織用醫用剪刀剪碎，并放入試管中；B2：將溶解液倒入試管中，并使用設備對試管進行擺動；本發明通過將羊膜與胎盤進行分離，以便于對羊膜進行清洗處理，進而將羊膜上的血液和殘片進行祛除，通過將羊膜組織進行剪碎使更多的羊膜干細胞露出，以此可增加對羊膜干細胞的提取量，通過將酶解液與細胞液混合并放入室內進行溫化培養，可使細胞從羊膜組織分離出來。

技術領域

本發明涉及羊膜干提取技術領域，具體為一種胎盤中提取分離羊膜干的 方法。

背景技術

羊膜干細胞具有神經生物學功能，與神經干細胞具有同源性，神經干細 胞，研究雖起步較晚，但卻是當前研究的熱點，由于成體神經組織內NSC數 量少，分散分布，取材困難，無免疫原性NSC細胞系建立困難以及異體移植 存在的免役排斥問題等原因，使NSC在神經系統疾病治療中的應用受到一定 的限制，隨著對羊膜上皮細胞具有神經干細胞特性的研究逐步深入，羊膜干 細胞為治療神經系統退行性疾病和外傷性神經損傷將會帶來新的契機，目前， 在對羊膜干細胞進行提取時，由于操作復雜進而增加了對羊膜干細胞提取的成本，且現有的技術無法快速對羊膜干細胞進行分離提取，從而降低了對羊 膜干細胞提取的工作效率。

發明內容

本發明的目的在于提供一種胎盤中提取分離羊膜干的方法，具備提取效 率高的優點，解決了目前，在對羊膜干細胞進行提取時，由于操作復雜進而 增加了對羊膜干細胞提取的成本，且現有的技術無法快速對羊膜干細胞進行 分離提取，從而降低了對羊膜干細胞提取工作效率的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種胎盤中提取分離羊膜 干的方法，包括如下步驟：

A：將羊膜和胎盤進行處理，然后對羊膜進行清洗；

A1：首先將胎盤固定于機械上，對羊膜與胎盤進行剝離；

A2：然后通過清洗水對羊膜進行清洗，祛除血液和殘片；

B：羊膜分塊；

B1：將羊膜組織用醫用剪刀剪碎，并放入試管中；

B2：將溶解液倒入試管中，并使用設備對試管進行擺動；

C：細胞溫化；

C1：將試管中的羊膜取出，得到細胞液，將細胞液倒入器皿中進行培養；

C2：向器皿中倒入酶解液，然后將器皿放入室內進行溫化；

C3：將器皿靜置放置后，取出上清液體，得到細胞懸液；

D：細胞收集；

D1：將細胞懸液進行過濾，使液體與殘渣分離，然后用生理鹽水對細胞 懸液進行清洗，得到干凈的細胞懸液；

D2：對細胞懸液進行離心，取出上清液體，得到羊膜干細胞。

優選的，所述步驟A1中的機械為旋轉夾持機械，且采用低速電機作為動 力源。

優選的，所述驟A2中的清洗水為醫用酒精，其濃度含量為百分之七十五。

優選的，所述步驟B1中的醫用剪通過濃度含量百分之七十五的酒精消毒 后進行使用，且羊膜組織剪碎的長度和寬度均為一厘米。

優選的，所述步驟C1中的試管采用高溫殺菌后進行使用，殺菌溫度為一 百攝氏度至一百二十攝氏度，且細胞培養時間為五個小時至八個小時。

優選的，所述步驟C2中倒入的酶解液高于羊膜組織一厘米至一點五厘米， 且細胞溫化的室內溫度為三十七攝氏度至三十八攝氏度。