[發(fā)明專利]一種流感病毒檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111040012.3
• 申請日: 2021-09-06
• 公開（公告）號: CN113621737A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發(fā)明（設計）人: 董進法;林春美;謝璐;馮書陽;黃紀虹;何穎;張巍;廖文
• 申請（專利權）人: 遼寧佰昊生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93
• 代理公司: 北京知呱呱知識產(chǎn)權代理有限公司 11577
• 代理人: 鄭興旺

本發(fā)明公開了一種流感病毒檢測試劑盒及其應用，試劑盒包括以下組分：醋酸鎂溶液、緩沖液、酶粉、CutSmart Buffer、Recombinant RNase Inhibitor、DNA熒光探針、Cas12a、引物組、FluA?crRNA和FluB?crRNA；引物組包括FluA?RPA引物、FluB?RPA引物、FluA?crRNA引物和FluB?crRNA引物。本發(fā)明公開的流感病毒檢測試劑盒對流感病毒的靈敏度高，檢測精度和準確率高，檢測周期短，且操作十分簡便，不依賴專業(yè)人員、專業(yè)儀器和檢測條件，十分適合在基層醫(yī)療檢疫機構中推廣。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及一種流感病毒檢測試劑盒及其應用。

背景技術

流行性感冒是由流感病毒引起的一種傳染性呼吸道疾病，在世界各地流行。盡管經(jīng)濟進步和醫(yī)療技術發(fā)展有所改善，但流感仍不可避免地導致住院治療和相當大的死亡率。據(jù)估計，全球每年約有10億例病例感染有癥狀的流感病毒，其中3–500萬例嚴重疾病和296.5萬例與流感相關的呼吸系統(tǒng)死亡。這可能與巨大的經(jīng)濟負擔結合在一起，涉及直接和間接成本。從接觸流感病毒到感染，其潛伏期約為4-5d，其臨床表現(xiàn)無特異性，與其他呼吸系統(tǒng)病原體感染不易區(qū)別，因此早期、快速、準確地診斷流感對迅速實施抗病毒治療尤為重要。

目前流感的主要檢測方法包括病毒分離、病毒抗原和基因檢測以及血清學檢測等，核酸檢測作為目前主要的流感病毒診斷方法，其靈敏度高，特異性強，能夠早期診斷，在防止疫情暴發(fā)流行、延緩傳播速度等方面起到了重要作用。但傳統(tǒng)基于PCR的方法需要變性、退火、延伸三個步驟，每個步驟的溫度不一樣，需要專門的熱循環(huán)儀來進行，限制了其使用范圍。并且，現(xiàn)有的用于檢測流感的引物組，只適用于特定方法如傳統(tǒng)PCR等，并不適用于RPA擴增，因而不能與檢測條件相匹配從而達到最好的檢測效果。

發(fā)明內(nèi)容

為此，本發(fā)明實施例提供一種流感病毒檢測試劑盒及其應用，以解決上述現(xiàn)有技術中存在的問題。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明實施例提供如下技術方案：

第一方面，本發(fā)明實施例提供了一種流感病毒檢測試劑盒，包括以下組分：

醋酸鎂溶液、緩沖液、酶粉、CutSmart Buffer、Recombinant RNase Inhibitor、DNA熒光探針、Cas12a、引物組、FluA-crRNA和FluB-crRNA；引物組包括 FluA-RPA引物、FluB-RPA引物、FluA-crRNA引物和FluB-crRNA引物

優(yōu)選地：

FluA-RPA引物的核苷酸序列包括：

引物A，其核酸序列為5'-aagaccgatcttgtcacctctgac-3'

引物B，其核酸序列為5'-cattttggacaaatcgtctacgctg-3'

FluB-RPA引物的核苷酸序列包括：

引物C，其核酸序列為5'-atcggatcctcaactcactcttcgagcg-3'

引物D，其核酸序列為5'-taatcggtgctcttgaccaaattg-3'

FluA-crRNA引物的核苷酸序列包括：

引物E，其核酸序列為5'-gaaattaatacgactcactatagggtaat-3'

引物F，其核酸序列為5'-cctaaaatccccttagtcagaggt-3'

FluB-crRNA引物的核苷酸序列包括：

引物G，其核酸序列為5'-gaaattaatacgactcactatagggtaat-3'