[發明專利]烏苯苷在制備下調腫瘤細胞PD-L1水平的制劑中的應用

在審

• 申請號: 202111033779.3
• 申請日: 2021-09-03
• 公開（公告）號: CN113827607A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 劉相國;蘇玲;李曉鵬;孫慶國;王瑩瑩
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;A61P35/00;A61P11/00
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李健康

本發明公開了一種烏苯苷在制備下調腫瘤細胞PD?L1水平的制劑中的應用，其中有效下調腫瘤細胞PD?L1水平的烏苯苷的濃度為100～200nmol/L。本發明證明了烏苯苷可以通過改變細胞質中Ca²⁺穩態來誘導腫瘤細胞產生內質網應激，干擾PD?L1正常的糖基化修飾。內質網應激后，PD?L1進而被RNF19B識別并進行泛素化，最終導向蛋白酶體降解。本發明還揭示RNF19B會影響USP22與PD?L1的結合，減弱PD?L1在腫瘤細胞內的穩定性。本發明的應用實現了通過下調腫瘤中的PD?L1水平抑制腫瘤的發展，為研制開發有關制備下調腫瘤細胞PD?L1水平的制劑奠定了基礎，也為傳統藥物在腫瘤治療領域中的二次開發提供了一定的參考和啟示，為提高免腫瘤疫療法的技術手段和臨床療效提供了新的策略。

技術領域

本發明涉及鈉-鉀ATP酶抑制劑烏苯苷的應用，尤其涉及烏苯苷在制備下調腫瘤細胞 PD-L1(Programmed Cell Death 1Ligand 1，細胞程序性死亡受體配體1，又稱為CD274或 B7-H1)水平的制劑中的應用，屬于生物醫藥和分子生物學技術領域。

背景技術

PD-L1是存在于腫瘤細胞質膜的糖蛋白，通過與T淋巴細胞表面的PD-1(Programmed Death Receptor1，細胞程序性死亡受體-1)結合后，抑制T細胞的增殖、細胞因子的釋放和 殺傷能力，最終導致免疫系統功能的抑制。針對PD-1/PD-L1通路目前正在或已經開展的臨 床實驗已有報道，在臨床診治某些癌癥，比如黑色素瘤、非小細胞型肺癌、膀胱癌、乳腺癌、 淋巴癌以及腎臟細胞癌方面都收獲了不錯的效果。目前上市的相關藥物主要有 pembrolizumab、nivolumab、pidilizuma、durvalumab、atezolizumab等單克隆抗體。但是，隨 著腫瘤免疫治療的進一步開展，其使用效率并非盡如人意，脫靶效應、抗藥性以及潛在的毒 副作用等相繼出現。

天然小分子化合物一直是治療癌癥等重點疾病的藥物來源，通過藥物的篩選尋找具有抗 癌活性的小分子化合物，具有快速、經濟、簡便、有效的特點。天然活性的化合物還可以作 為先導物通過適當的結構改造便有望成為新一代的腫瘤免疫治療藥物。因此尋找能夠下調腫 瘤細胞中PD-L1表達的天然小分子化合物也是目前熱門的科研課題。

烏苯苷是一種甾類糖苷，別名g-毒毛旋花苷。用作強心劑。烏苯苷可用于研究鈉-鉀 ATP酶的特異性抑制劑(k-毒毛旋花苷也有效)，其強心作用也是基于此種抑制作用。烏苯苷 作為一種強心苷類化合物在自然界中廣泛存在，在臨床上主要用于治療心衰和心律不齊。 常見的強心苷主要有地高辛、烏苯苷、夾竹桃苷和蟾毒靈幾類。強心苷的作用位點為質膜 上的Na⁺-K⁺-ATPase(NKA)。對于烏苯苷的相關實驗表明，烏苯苷對于機體免疫具有一定的 影響。

烏苯苷可以活化免疫細胞以及提高免疫細胞抵抗自身凋亡的能力，以此來消除癌細胞 產生的免疫抑制。然而，檢索發現烏苯苷對腫瘤細胞中PD-L1的相關影響目前尚未見報道。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明要解決的問題是提供一種烏苯苷在制備下調腫瘤細胞PD- L1水平的制劑中的應用。

本發明所述烏苯苷在制備下調腫瘤細胞PD-L1水平的制劑中的應用。

其中：有效下調腫瘤細胞PD-L1水平的烏苯苷的濃度為100～200nmol/L。所述的腫瘤 為PD-L1受體天然高表達或因為腫瘤的治療導致PD-L1受體高表達的腫瘤。

優選的，有效下調腫瘤細胞PD-L1水平的烏苯苷的濃度為200nmol/L。所述的腫瘤為非 小細胞肺癌。

本發明提供了一種針對PD-L1泛素化的調控方式，有助于進一步了解PD-L1有關的分 子機制，為設計相關藥物提供理論依據。

本發明揭示了烏苯苷在抗腫瘤免疫反應中的潛力，為傳統藥物在腫瘤治療領域中的二次 開發提供了一定的參考和啟示。