[發(fā)明專利]一種鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑及制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111033109.1
• 申請(qǐng)日: 2021-09-03
• 公開（公告）號(hào): CN113730592A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉斌;楊忠如;于志剛;張澤越;景立坤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林正業(yè)生物制品股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K47/42
• 分類號(hào): A61K47/42;A61K47/26;A61K47/20;A61K47/32;A61K47/36;A61K9/19;A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 沈陽一諾君科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 21266
• 代理人: 劉麗娟

本發(fā)明公開了一種鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑，由明膠、多聚蛋白胨、胰蛋白胨、酶解酪蛋白、乳糖、蔗糖、硫脲、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、山梨醇和注射用水組成；將鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑與鴨坦布蘇病毒原液按體積比1:1.5混合分裝，經(jīng)真空冷凍干燥處理得鴨坦布蘇病毒病活疫苗。本發(fā)明耐熱保護(hù)劑，各組分相互作用，提高疫苗凍干過程中對(duì)溫度的耐受性，減少效力損失，凍干前后病毒損失率不超過0.3個(gè)滴度，本發(fā)明鴨坦布蘇病毒病凍干耐熱保護(hù)劑用于鴨坦布蘇病毒病活疫苗，其特點(diǎn)為耐老化程度高，37℃放置15天，物理性狀良好，每瓶疫苗的病毒滴度僅下降0.2～0.3個(gè)，2～8℃條件下可存放36個(gè)月，滴度無明顯下降。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疫苗耐熱保護(hù)劑領(lǐng)域，特別是一種鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑及制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

坦布蘇病毒病俗稱“黃病毒病”、“出血性卵巢炎”，最早于2010年在浙江某鴨群被發(fā)現(xiàn)，隨后證明它是由坦布蘇病毒感染引起的。該病可造成產(chǎn)蛋鴨、鵝群產(chǎn)蛋率驟然下降至絕產(chǎn)，亦可引起雛鴨、鵝出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、癱瘓和死亡。給我國水禽養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。隨著鴨群在產(chǎn)前多使用免疫效果更確實(shí)的活疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防，當(dāng)前臨床上已鮮有該病引起降蛋的案例發(fā)生。坦布蘇病毒病活疫苗以及大多數(shù)獸用活疫苗產(chǎn)品使用常規(guī)凍干保護(hù)劑。常規(guī)保護(hù)劑主要成分為脫脂牛奶、蔗糖、明膠等，組方簡(jiǎn)單、配制簡(jiǎn)便、易溶性良好，但熱穩(wěn)定性和保護(hù)功能差，產(chǎn)品的保存條件較為苛刻，大多需要在-15℃以下保存。在疫苗生產(chǎn)、運(yùn)輸以及使用過程中，如果冷鏈系統(tǒng)控制不當(dāng)，疫苗保存環(huán)境溫度升高，常常導(dǎo)致疫苗效力下降或失效，造成免疫失敗。發(fā)達(dá)國家早在20世紀(jì)80年代就開始進(jìn)行耐熱保護(hù)劑的研究，目前已經(jīng)基本采用耐熱保護(hù)劑生產(chǎn)活疫苗，但由于保護(hù)劑的研究和應(yīng)用均屬于專利資料，各國都處于保密狀態(tài)，耐熱凍干保護(hù)劑比常規(guī)的凍干保護(hù)劑更周到地考慮了具有生物活性的制品在較高溫度和較長(zhǎng)保存時(shí)間的情況下，凍干過程可能產(chǎn)生的物理和化學(xué)變化對(duì)活疫苗存活的影響，通過添加填充劑、防凍劑、抗氧化劑、酸堿調(diào)整劑、緩沖劑、羥基中和劑、低分子化合物、高分子化合物等，確保病毒在2～8℃條件下，保存期可達(dá)24個(gè)月，效價(jià)無明顯下降，因而其保護(hù)性能要比傳統(tǒng)保護(hù)劑更為優(yōu)良，從而使活疫苗的儲(chǔ)存、運(yùn)輸和使用更方便、經(jīng)濟(jì)。隨著我國規(guī)模化養(yǎng)殖的飛速發(fā)展，養(yǎng)殖密度加大，防疫模式也要相應(yīng)的變化，防疫質(zhì)量是其中的關(guān)鍵問題，活疫苗的冷鏈運(yùn)輸及儲(chǔ)存溫度要求非常高，控制不好直接影響疫苗質(zhì)量，耐熱保護(hù)劑的研制開發(fā)顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是要解決鴨坦布蘇病毒病疫苗因冷鏈運(yùn)輸控制不好影響疫苗質(zhì)量的問題，提供一種鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑及制備方法和應(yīng)用。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明是按照以下技術(shù)方案實(shí)施的：

本發(fā)明的第一個(gè)目的是要提供一種鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑，由以重量百分比計(jì)的組份組成：明膠0.8～1.2％、多聚蛋白胨3～6％、胰蛋白胨2～5％、酶解酪蛋白3～6％、乳糖5～10％、蔗糖1～3％、硫脲1～5％、聚乙烯吡咯烷酮0.5～3％、葡聚糖0.1～1％、山梨醇0.1～2％，余量為注射用水。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑，由以重量百分比計(jì)的組份組成：明膠1％、多聚蛋白胨4.5％、胰蛋白胨3％、酶解酪蛋白3.5％、乳糖10％、蔗糖3％、硫脲2.5％、聚乙烯吡咯烷酮1.2％、葡聚糖0.6％、山梨醇0.6％，余量為注射用水。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述聚乙烯吡咯烷酮為聚乙烯吡咯烷酮PVPK30。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是要提供一種如權(quán)利要求1所述的鴨坦布蘇病毒病活疫苗凍干保護(hù)劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

用玻璃容器稱取配制總體積的3/5蒸餾水，按順序依次將明膠、多聚蛋白胨、胰蛋白胨、酶解酪蛋白、乳糖、蔗糖、硫脲、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、山梨醇加入蒸餾水中，將玻璃容器置于超聲波加熱水浴中，攪拌加熱及超聲波高頻振動(dòng)使各組分完全溶解后加入余量注射用水，再進(jìn)行滅菌處理。