[發明專利]一種用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料的制備方法

在審

• 申請號: 202111031937.1
• 申請日: 2021-09-03
• 公開（公告）號: CN113804813A
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 劉德云;曾彬;任興發;屠炳芳
• 申請（專利權）人: 江蘇月旭新材料科技有限公司;上海維樂希檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 高燕;許亦琳

本發明提供一種用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料的制備方法，包括：乳化后的溶液A在惰性氣體保護下原位聚合；然后輪流加入乳化后的溶液B和乳化后的溶液C進行原位沉積和交聯獲得所述用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料；溶液A包括2wt％～40wt％第一單體、0.5wt％～5wt％引發劑、0.5wt％～15wt％穩定劑，余量為水；溶液B包括5wt％～40wt％第三單體、1wt％～30wt％第四單體和0.5wt％～5wt％引發劑，余量為水；溶液C包括0.5wt％～15wt％的穩定劑，余量為水。其從而達到簡化操作流程、縮短制備周期、降低生產成本、減少污染浪費的目的。

技術領域

本發明涉及色譜填料領域，特別是涉及一種用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料。

背景技術

糖尿病在我國的發病率逐年提高，因血糖控制差引起的致殘、致死案例不斷增多。糖化血紅蛋白(HbA1c)由于其能體現患者近2個月的血糖情況，對于幫助醫生更好的評估病人病情具有較大幫助，因此其作為糖尿病患者的血糖監測指標在臨床上被廣泛認可。

目前測定糖化血紅蛋白的方法主要包括高效液相離子交換色譜法、硼酸親和層析法、免疫分析法等。其中高效液相色譜法已被臨床醫生作為評估糖尿病血糖控制水平的相對金標準。高效離子交換色譜法主要利用不同成分的血紅蛋白帶電性的不同，與其填料的結合力大小的不同而實現分離。

糖化血紅蛋白分離填料以小粒徑單分散親水聚合物顆粒為主，此外還有少量的生物大分子填料和硅膠填料，其中單分散聚合物填料的制備以種子溶脹法和分散聚合法為主。

種子溶脹法是由Ugelstad J.于90年代初提出，主要是利用乳液聚合制備的顆粒作為種子，然后用單體、交聯劑、溶脹劑等進行多步溶脹、聚合，從而得到粒徑更大的聚合物顆粒。專利CN1412554A采用種子溶脹法合成了氯甲基化聚苯乙烯-二乙烯基苯基質微球，并在其基礎上通過胺化和表面沉積制備得到磺酸化的單分散陽離子填料。但聚苯乙烯-二乙烯基苯顆粒由于其表面較強的疏水性容易對生物大分子產生不可逆吸附，從而導致分離效果下降。同樣的，專利CN1132213A采用一步種子溶脹法制備了聚苯乙烯交聯微球和聚乙烯吡啶交聯微球，但是同樣沒能避免不可逆吸附的問題。專利CN110314664A和專利CN1785526A也都采用種子溶脹法制備得到可用于糖化血紅蛋白分析的單分散色譜填料，它是主要利用親水性單體等對種子顆粒進行溶脹聚合，從而制得表面親水的單分散色譜填料。雖然一定程度上降低了填料對蛋白分子的不可逆吸附，但是填料制備過程依然復雜?？傊N子溶脹法的優點是制備的填料顆粒較為均一，缺點則是整個制備過程操作繁瑣，條件苛刻，周期過長，成本過高，產生的廢液過多等。

分散聚合主要通過在反應前將單體、甲醇或乙醇等有機溶劑、油溶引發劑等混合為均一的體系，升溫引發反應后，聚合物單體開始聚合并達到一定分子量后析出并纏繞，最終形成一定大小的聚合物顆粒。分散聚合法主要用于制備非交聯以及低交聯聚合物顆粒。在利用分散聚合法制備聚苯乙烯-二乙烯基苯交聯微球的過程中，當采用一次投料來制備交聯聚苯乙烯微球時，交聯劑二乙烯基苯的比例不能大于1％，否則將會使得制備得到的顆粒均一性下降，呈多分散狀態，嚴重的可能導致物料結塊而使反應徹底失敗。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料的制備方法，其簡單、高效、低成本、環保用于解決現有技術中的問題。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明是通過以下技術方案獲得的。

本發明提供一種用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料的制備方法，包括如下步驟：

乳化后的溶液A在惰性氣體保護下原位聚合；然后輪流加入乳化后的溶液B和乳化后的溶液C進行原位沉積和交聯獲得所述用于糖化血紅蛋白分離的色譜填料；