[發明專利]具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗藥性個體篩選方法

在審

• 申請號: 202111019332.0
• 申請日: 2021-09-01
• 公開（公告）號: CN113693031A
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 徐麗娜;徐婷婷;胡飛;胡本進;畢思佳;佟強
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院植物保護與農產品質量安全研究所
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033;A23K50/90;A23K10/30;A23K20/147;A23K20/174;A23K10/18;A23K20/105;A23K20/163
• 代理公司: 北京盛凡佳華專利代理事務所(普通合伙) 11947
• 代理人: 胡歡

本發明公開了具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗藥性個體篩選方法，包括如下步驟：2齡初期幼蟲培養、測定毒力回歸線、藥劑篩選、獲得抗性個體。本發明使用2齡初期幼蟲作為試驗對象進行抗藥性篩選，整個篩選過程操作簡單，大大減少抗性篩選的勞動用工，且有效提高了具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的養蟲成活率。

技術領域

本發明屬于昆蟲抗藥性篩選領域，尤其涉及具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗藥性個體篩選方法。

背景技術

同種生物間自相殘殺的行為在鱗翅目昆蟲中比較常見，比如草地貪夜蛾、棉鈴蟲等均具有自相殘殺的習性。這種行為可能會提高其存活率、發育速度及繁殖力，進而使其在種群競爭中獲得直接優勢、更有利于自身的生存和繁殖。一些鱗翅目昆蟲，比如草地貪夜蛾即使在食料充足的情況下仍會發生自相殘殺，尤其是在較高的飼養密度下的高齡幼蟲間這種現象更為普遍。

害蟲抗藥性的產生是制約農藥持續應用的關鍵因素，在研究害蟲抗藥性時，為避免田間防治過程中多種殺蟲劑對目標昆蟲的共同影響，通常需要通過室內抗性選育獲得抗性種群，并在此基礎上對抗性風險、抗性機制和生物適合度等問題進行探討。

目前對于鱗翅目昆蟲抗藥性種群的篩選，通常使用初孵或3齡幼蟲作為試驗對象。但對于有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲，待長至3齡幼蟲階段，已表現出較強的自相殘殺行為，需要單頭分開飼養，如果在此階段進行藥劑篩選將需要更多的人力和時間。而初孵幼蟲通常對藥劑的敏感性更強，使用其作為試驗對象較難確定藥劑使用濃度，濃度過高試驗對象極易全部死亡，無法成功繼代飼養，濃度過低卻又較難獲得抗性個體。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的以上問題，提供具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗藥性個體篩選方法，使用2齡初期幼蟲作為試驗對象進行抗藥性篩選，整個篩選過程操作簡單，大大減少抗性篩選的勞動用工，且有效提高了具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗性個體獲得率。

為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現：

具有自相殘殺習性的鱗翅目昆蟲的抗藥性個體篩選方法，包括如下步驟：

S1,將人工飼料平鋪入養蟲盒內，鋪入厚度為4-6mm，在人工飼料上面插入塑料框架，將人工飼料分隔為2cm×2cm的小塊，向飼料塊中接入已經變黑將要孵化的卵粒，接入量為60-80頭/cm²，飼養3d，得到2齡初期幼蟲；

S2,使用步驟S1中的2齡初期幼蟲為試驗對象，通過相應生物測定方法，獲得藥劑作用24-72h的殺蟲毒力回歸線；

S3,按照步驟S1的方法培養得到2齡初期幼蟲，根據篩選要求依據毒力回歸線獲得殺蟲40-80％的藥劑濃度，將藥劑與人工飼料混合，配制成帶藥人工飼料，將帶藥人工飼料平鋪入養蟲盒內，鋪入厚度為4-6mm，在帶藥人工飼料上面插入塑料框架，將帶藥人工飼料分隔為2cm×2cm的小塊，并將培養得到的2齡初期幼蟲全部轉接到帶藥人工飼料塊中，給藥飼養24-72h；

S4,給藥時間結束后，將上述帶藥飼料中存活的幼蟲單頭接入裝有人工飼料的養蟲盒，飼養至幼蟲老熟化蛹，得到抗藥性的鱗翅目昆蟲種群。

進一步地，所述人工飼料由如下份量數的原料組成：大豆粉10-15份、玉米粉10-15份、干酪素5-7.5份、酵母粉4-6份、抗壞血酸0.5-1.5份、氯化膽堿0.15-0.3份、肌醇0.01-0.02份、B族維生素4-8份、山梨酸鉀0.3-0.5份、瓊脂3-5份、去離子水80-110份。

進一步地，所述步驟S2中的生物測定方法為胃毒毒力測定。

進一步地，所述步驟S1和步驟S3中養蟲盒的長度、寬度、高度分別為10cm、10cm、8cm。

進一步地，所述步驟S1中將要孵化的卵粒飼養至2齡初期幼蟲的飼養條件為：溫度27-29℃、相對濕度50-70％、光周期14L:10D-8L:16D。