[發(fā)明專利]一種基于碳點(diǎn)和CuInS2/ZnS量子點(diǎn)的比率熒光檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111010643.0
• 申請(qǐng)日: 2021-08-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113777083B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓志鐘;陳曉萍;林建偉;陳敬華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

1.一種基于碳點(diǎn)和CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)?的用于檢測(cè)金霉素的熒光探針的方法，其特征在于：包括如下步驟：以水熱法制備了富含氨基的具有藍(lán)色熒光的碳點(diǎn)，并且通過(guò)回流法制備了羧基修飾的具有紅色熒光的CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)，將碳點(diǎn)和CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)通過(guò)共價(jià)偶聯(lián)構(gòu)建雙發(fā)射比率熒光探針，用于檢測(cè)金霉素；

CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)的制備包括：將2?mL?0.01?M的銅儲(chǔ)備液，0.08?mL?1?M的銦儲(chǔ)備液，0.8?mL?0.4?M的檸檬酸鈉儲(chǔ)備液，0.0125?g?L^-1谷胱甘肽和40?mL去離子水置于50?mL三頸燒瓶中；隨后，在磁力攪拌下將0.124?mL?1?M?Na₂S儲(chǔ)備液加入燒瓶中，調(diào)節(jié)其pH值為5.5，在100℃水浴加熱下反應(yīng)40?min，制備CuInS₂核；之后重復(fù)4次注入2?mL?0.04?M的ZnS儲(chǔ)備液控制ZnS殼的厚度；待溶液冷卻至室溫后，通過(guò)超濾離心純化得到三元量子CuInS₂/ZnS沉淀，將其濃縮4倍并分散至去離子水中；取10?mL?CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)于燒瓶中，加入0.1?mL的2-甲基-3-丁炔-2-胺溶液，調(diào)節(jié)其pH值為10.8，在100℃水浴加熱下反應(yīng)1.5?h，得到羧基修飾的量子點(diǎn)；

比率熒光探針的構(gòu)建包括：將富含氨基的碳點(diǎn)稀釋100倍后，取10μL于比色皿中稀釋至200μL，記錄原始藍(lán)色熒光；獲得的CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)加入，436?nm處的熒光發(fā)射峰逐漸下降，且在664?nm處的熒光隨之增強(qiáng)；該比率熒光探針由4.27μg?mL^-1的碳點(diǎn)與0.7?mM的CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)構(gòu)成；

金霉素的檢測(cè)包括：在制得的上述比率熒光探針溶液中加入82.5μL、pH=11.0的PBS緩沖溶液；隨后加入不同濃度0、1μM、2μM、4μM、6μM、8μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM、60μM、70μM的金霉素溶液，混勻放置一段時(shí)間后，開(kāi)始進(jìn)行測(cè)定；采用普通熒光和同步熒光兩種熒光模式，普通熒光激發(fā)波長(zhǎng)為360?nm和同步熒光激發(fā)波長(zhǎng)為△λ=?90?nm，激發(fā)電壓為600?V下對(duì)金霉素進(jìn)行檢測(cè)，隨著金霉素的濃度增加，碳點(diǎn)的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，而量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度不變，建立加入金霉素前后碳點(diǎn)和量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度比差值（）與金霉素濃度之間的關(guān)系，實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)金霉素，利用普通熒光模式所的到的線性關(guān)系為?I_R?=?0.0665?C_CTC?+0.008，相關(guān)系數(shù)為0.997，該方法的檢測(cè)限為0.59?μM，線性范圍為0?-?70?μM；通過(guò)同步熒光模式所得到的線性關(guān)系為，相關(guān)系數(shù)為0.998，該方法的檢測(cè)限為0.40?μM，而該線性范圍為0?-?50?μM；通過(guò)對(duì)同步熒光和熒光兩個(gè)方法的比較，同步熒光的線性關(guān)系和檢測(cè)限較熒光好。