[發明專利]一種從裂殖壺菌中提取角鯊烯的方法及角鯊烯在保濕抗衰老化妝品中的應用

有效

• 申請號: 202111006960.5
• 申請日: 2021-08-30
• 公開（公告）號: CN113604512B
• 公開（公告）日: 2023-09-19
• 發明（設計）人: 周坤江
• 申請（專利權）人: 汕頭市奇偉實業有限公司
• 主分類號: C12P5/02
• 分類號: C12P5/02;C12N1/14;C12M1/40;C12M1/38;C12M1/34;C12M1/02;C12M1/00;C07C7/00;C07C11/21;A61K8/31;A61Q19/00;A61Q19/08;C12R1/645
• 代理公司: 廣東興邦華騰專利代理事務所(特殊普通合伙) 44547
• 代理人: 張樹峰;梁鳳德

本發明涉及一種從裂殖壺菌中提取角鯊烯的方法及角鯊烯在保濕抗衰老化妝品中的應用，包括以下步驟：將裂殖壺菌活化，接入一級種子培養基中培養得到一級種子，再取一級種子接入二級種子培養基中培養得到二級種子；將二級種子接種于發酵培養基發酵培養得到發酵液；在發酵液中加入堿性蛋白酶，對裂殖壺菌進行酶解破壁；在破壁后的菌液中加入無水乙醇，經振蕩離心分離除去上清液水?乙醇相，收集底層菌泥；在底層菌泥中加入正己烷，振蕩離心收集上清液，重復若干次，直到上清液無色透明，最后蒸發去除正己烷，收集得到角鯊烯粗品；將角鯊烯粗品進行脫膠、脫酸、漂白和脫臭處理，得到純化的角鯊烯。本發明解決了目前角鯊烯提取產量低、成本高的問題。

技術領域

本發明涉及化妝品技術領域，特別涉及一種從裂殖壺菌中提取角鯊烯的方法及角鯊烯在保濕抗衰老化妝品中的應用。

背景技術

角鯊烯是由6個異戊二烯連接而成的高度不飽和的直鏈三萜類化合物，別名鯊萜、三十碳六烯、魚肝油萜或角鯊油素，系統命名為2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，分子式為C₃₀H₅₀，常溫下為淡黃色或無色油狀液體。角鯊烯具有提高缺氧耐受力功能、抑制微生物生長、抗菌消炎、調節膽固醇代謝等生物活性功效。而且角鯊烯是一種具有抗衰老、抗癌作用的無毒性的強化劑。

角鯊烯來源廣泛，存在于微生物、植物種籽、微藻、鯊魚肝臟及人體皮脂中。目前，角鯊烯主要是從植物種籽中提取分離，但是其缺點是角鯊烯被提取出的量非常少，而且需要進行大量富集和純化過程，成本較高。裂殖壺菌是海洋微藻的一種，在裂殖壺菌藻細胞油脂中主要包括二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等不飽和脂肪酸，也還包括角鯊烯。雖然微藻在異養條件下產生角鯊烯，并且可通過可控制的發酵條件來提供高質量的角鯊烯，這些角鯊烯純化后能滿足食品、化妝品和醫學需求，但是現有技術從微藻中提取出的角鯊烯產量相對還是較低的。

有鑒于此，確有必要提供一種新的方法以從裂殖壺菌中提取產量較高的角鯊烯。

發明內容

本發明的主要目的是提供一種從裂殖壺菌中提取角鯊烯的方法及角鯊烯在保濕抗衰老化妝品中的應用，旨在解決目前角鯊烯提取產量低、成本高的問題。

為實現上述目的，第一方面，本發明提出了一種從裂殖壺菌中提取角鯊烯的方法，包括以下步驟：

S1、裂殖壺菌的培養：

S11、將裂殖壺菌轉接于斜面，于25℃下培養3～4d，將裂殖壺菌活化，然后用接種環挑取活化的裂殖壺菌，接入一級種子培養基中以25℃、200r/min培養2d，得到一級種子，最后再取一級種子接入二級種子培養基中，以25℃、200r/min培養2d，得到二級種子；其中，所述一級種子培養基和所述二級種子培養基均由30g/L葡萄糖、10g/L酵母提取物和15g/L礦物質組成；

S12、將二級種子按照6％的接種量轉入發酵機構中的發酵培養基進行發酵培養，罐壓0.025MPa，通氣量5L/min，攪拌速度40r/min，發酵6d，得到發酵液；其中，所述發酵培養基由120g/L葡萄糖、10g/L酵母提取物、30g/L礦物質和0.15g/L復合維生素組成；在所述發酵培養過程中分批流加葡萄糖，每隔8～12h加一次，每次加30g/L；

S2、裂殖壺菌的破壁：

將步驟S12得到的發酵液轉入酶解機構中，往其加入堿性蛋白酶，對裂殖壺菌進行酶解破壁，酶解溫度為63℃，pH為7.8，酶解時間為6h；

S3、角鯊烯的提取：

S31、在步驟S2破壁后得到的菌液中加入無水乙醇，菌液和無水乙醇的體積比為1：1.2，經過離心機構振蕩離心分離除去上清液水-乙醇相，收集底層菌泥；