[發明專利]2型糖尿病靈長類動物模型的構建方法

在審

• 申請號: 202111003410.8
• 申請日: 2021-08-30
• 公開（公告）號: CN113728975A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發明（設計）人: 郭祥玉;陳若虹;徐強
• 申請（專利權）人: 廣州伊納維森生物科技有限公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 郭煒綿

本發明公開了2型糖尿病靈長類動物模型的構建方法，包括以下步驟：取中年實驗猴，喂食高糖高脂飼料，籠舍的熄燈時間為2:00?12:00，兩周后調整為正常的熄燈時間20:00至次日6:00，再兩周后調整為2:00?12:00，如此輪流交替變化；至少6個月后，完成造模。本發明首次使用干擾動物晝夜節律和進食時間的方法迫使非人靈長類實驗動物改變作息時間，同時結合高糖高脂膳食造模，顯著提高造模效率，造模周期縮短了50％以上。并且該方法與自然發病機制相近。在停止誘導半年后仍維持糖尿病癥狀，說明該模型可作為一種穩定的T2DM模型。

技術領域

本發明涉及動物模型構建方法，具體涉及2型糖尿病靈長類動物模型的構建方法。

背景技術

目前2型糖尿病(Type II diabetes mellitus，T2DM)靈長類動物模型主要依賴天然篩選、高能量膳食誘導和藥物誘導獲得。然而，天然篩選獲得的模型動物數量有限，膳食誘導周期長且效率不高，藥物誘導的病理機制與臨床不同，應用范圍窄。

目前已報道的靈長類動物(猴)糖尿病模型主要有高糖高脂飲食誘導(CN103478071A)，光照誘導(CN108812525A)，以及結合注射化學藥物鏈脲佐菌素(STZ)誘導(CN 112425561A)等方式。

單純高糖高脂膳食誘導周期比較長，需要2-4年時間，成模效率也比較低下(不足5％)。

光照誘導的方法未見與2型糖尿病密切相關的肥胖癥狀，也未檢測到2型糖尿病常伴隨的糖、脂、膽固醇代謝異常，提示所誘導的模型與臨床的致病機理有顯著差異，可能不是良好的2型糖尿病模型。

化學藥物鏈脲佐菌素聯合高糖高脂膳食和夜間光照刺激的模型，其光刺激誘導是在STZ給藥4個月后才施加，STZ是直接損害胰島細胞的一種化學物，其引起的血糖增高未經過胰島素抵抗這一2型糖尿病的致病路徑，因此其模型與1型糖尿病更為貼近，與臨床的2型糖尿病致病機理有顯著差異。其模型也未出現肥胖和糖、脂、膽固醇代謝異常等與2型糖尿病密切相關的指征，也說明其模型不是一類良好的2型糖尿病模型。

發明內容

本發明的目的在于改進2型糖尿病靈長類動物模型的造模方法，通過對夜間熄燈時間的輪替調整，結合喂食高糖高脂飼料，實現了造模時間短、效率高的特點，所得動物模型具有與2型糖尿病致病機理密切相關的指征。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

2型糖尿病靈長類動物模型的構建方法，包括以下步驟：

取中年實驗猴，喂食高糖高脂飼料，籠舍的熄燈時間為2:00-12:00，兩周后調整為正常的熄燈時間20:00至次日6:00，再兩周后調整為2:00-12:00，如此輪流交替變化；至少6個月后，完成造模；

所述的中年實驗猴，年齡為14-18周歲；

所述的實驗猴，先剔除空腹血糖值過高的個體；具體地，剔除FPG≥4.5的實驗猴個體；

所述的實驗猴，優選食蟹猴(cynomolgus,Macaca fascicularis)；

所述的喂食，每天投喂兩次高糖高脂飼料，每次保障動物按最大進食意愿進食，具體投喂量可為200±50克/頭動物；此外每天投喂一次時令果蔬，平均每頭動物100克，飲用水可以隨時隨意獲取；

若籠舍的熄燈時間為2:00-12:00，則投喂時間為14:30和21:30；若籠舍的熄燈時間20:00至次日6:00，則投喂時間為9:30和16:00；

所述高糖高脂飼料的配方為：玉米粉16％、豆粕粉4％、麩皮4％、鈣粉0.3％、磷酸氫鈣0.4％、膨化大豆粉3.5％、蛋氨酸0.1％、賴氨酸0.1％、維生素C 0.3％、面粉18％、豬油15％、白砂糖30％、膽固醇0.3％、魚粉8％。