[發明專利]多肽、三聚體、SARS-CoV-2中和抗體的檢測試劑和檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202110986976.0
• 申請日: 2021-08-26
• 公開（公告）號: CN113512097B
• 公開（公告）日: 2023-01-03
• 發明（設計）人: 吳力強;程方明;龔育清;林曉濤;錢純亙
• 申請（專利權）人: 深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 張靈莉

本發明涉及一種多肽、三聚體、SARS?CoV?2中和抗體的檢測試劑和檢測試劑盒。該多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。上述多肽與SARS?CoV?2刺突蛋白受體的親和力較好，可以應用于SARS?CoV?2中和抗體的檢測試劑和檢測試劑盒中。

技術領域

本發明涉及免疫檢測技術領域，特別是涉及一種多肽、三聚體、SARS-CoV-2中和抗體的檢測試劑和檢測試劑盒。

背景技術

嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(severe acute respiratory syndrome coro-navirus 2，SARSCoV-2)屬于β屬的新型冠狀病毒，圓形或橢圓形，直徑60～140nm，電鏡下呈皇冠樣形狀。

SARS-CoV-2表面的棘突蛋白(spike protein，簡稱S蛋白)是冠狀病毒表面重要的受體結合位點，其可與細胞表面病毒特異性受體結合、介導病毒外膜與細胞融合、病毒吸附及穿膜；冠狀病毒S蛋白受體結合域(receptor binding domain，RBD)可使病毒與宿主細胞表面的血管緊張素轉化酶2(angiotensin-converting enzyme2，ACE2)結合，并使病毒進入宿主細胞。當SARS-CoV-2在侵入機體時，會刺激機體產生具有保護作用的中和抗體，專門阻止病原微生物進入細胞，防止感染。中和抗體是由適應性免疫應答細胞分泌的一種可溶性蛋白，具有識別病毒表面蛋白、阻斷其與細胞表面特異性受體結合的功能，從而發揮抗病毒作用。中和抗體的多少是疫苗免疫保護效果的一項重要指標，是疫苗評估和質控的重要依據。

目前用于檢測SARS-CoV-2中和抗體的試劑盒，多運用競爭法原理，利用重組S蛋白或S蛋白的RBD片段、和刺突蛋白受體來檢測待測樣本中的SARS-CoV-2中和抗體。然而，目前的重組S蛋白或S蛋白的RBD片段、和刺突蛋白受體的親和力較差，從而使得目前檢測SARS-CoV-2中和抗體的試劑盒的檢測準確性較差。

發明內容

基于此，有必要提供一種與刺突蛋白受體的親和力較好的多肽。

此外，還提供一種對刺突蛋白受體的親和力好的上述多肽的三聚體、含有上述多肽和/或上述三聚體的SARS-CoV-2中和抗體的檢測試劑和檢測試劑盒。

一種多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

上述多肽通過選取S蛋白第331位氨基酸至第583位氨基酸的多肽，并進行Q498Y突變，使得該多肽片段不僅能與SARS-CoV-2刺突蛋白受體特異性結合，而且其與刺突蛋白的親和力還高于天然RBD對刺突蛋白受體的親和力。

一種三聚體，所述三聚體由三條權利要求1所述的多肽聚合而成。

在其中一個實施例中，所述多肽通過三官能團的交聯劑聚合。

在其中一個實施例中，所述交聯劑選自三-(琥珀酰亞胺)氨基三乙酸酯、三-(2-馬來酰亞胺基乙基)胺、硫代琥珀酰亞胺基[2-6-(生物素酰胺)-2-(p-疊氮苯甲酰氨基)-己烷酰胺]乙基-1-3′-二硫丙酸酯及β-[三(羥基甲基)膦基]丙酸中的至少一種。

一種SARS-CoV-2中和抗體的檢測試劑，包括上述多肽和/或上述三聚體。

在其中一個實施例中，所述三聚體與固相載體綴合。

一種SARS-CoV-2中和抗體的檢測試劑盒，包括上述的三聚體、和能與所述三聚體特異性結合的競爭性物質，所述競爭性物質標記有信號物質。

在其中一個實施例中，所述競爭性物質為所述三聚體的抗體或SARS-CoV-2刺突蛋白受體。

在其中一個實施例中，所述競爭性物質包括人抗體Fc片段和連接在所述人抗體Fc片段上的兩條氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的多肽片段。