[發(fā)明專利]水解白酒丟糟的混合菌酶液的制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110985991.3 | 申請(qǐng)日： | 2021-08-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN113667609B | 公開(kāi)（公告）日： | 2023-05-12 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 雷翔云;鄧波;熊燕飛;李勇;敖靈;丁海龍;彭遠(yuǎn)松;馬卓;宋川 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 瀘州老窖股份有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/885;C12R1/685;C12R1/785 |
| 代理公司： | 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124 | 代理人： | 羅貴飛 |
| 地址： | 646000 四川省*** | 國(guó)省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 水解 白酒 混合 菌酶液 制備 方法 | ||
1.水解白酒丟糟的混合菌酶液的制備方法，其特征在于包括如下步驟：
a.分別從窖泥、丟糟、酒廠周邊環(huán)境土壤中取樣，用以白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基進(jìn)行篩選富集，經(jīng)分離純化后得到菌樣；
b.將步驟a得到的菌樣活化后進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，然后將其浸提，抽濾，離心后得到菌酶液A，將菌酶液A用于白酒丟糟的酶解，篩選得到H菌，經(jīng)發(fā)酵制得H菌酶液，經(jīng)IUPAC公布的濾紙酶活力的測(cè)定方法，H菌酶液酶活為5.0-5.8IU/ml；
c.分別從窖泥、丟糟、酒廠周邊環(huán)境土壤中取樣，用以H菌酶液酶解后的白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基進(jìn)行篩選富集，經(jīng)分離純化后得到菌樣；
d.將步驟c得到的菌樣活化后進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，然后將其浸提，抽濾，離心后得到菌酶液B，將菌酶液B與H菌酶液按1∶5-15的體積比混合后用于白酒丟糟的酶解，篩選得到L菌，經(jīng)發(fā)酵制得L菌酶液，經(jīng)IUPAC公布的濾紙酶活力的測(cè)定方法，L菌酶液酶活為0.70-0.78IU/ml；
e.分別從窖泥、丟糟、酒廠周邊環(huán)境土壤中取樣，用以H菌酶液和L菌酶液共同酶解的白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基進(jìn)行篩選富集，經(jīng)分離純化后得到菌樣；
f.將步驟e得到的菌樣活化后進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，然后將其浸提，抽濾，離心后得到菌酶液C，將菌酶液C、H菌酶液和L菌酶液按1∶10-20:1-10的體積比混合后用于白酒丟糟的酶解，篩選得到M菌，經(jīng)發(fā)酵制得M菌酶液，經(jīng)IUPAC公布的濾紙酶活力的測(cè)定方法，M菌酶液酶活為0.45-0.49IU/ml；
g.將H菌酶液、L菌酶液和M菌酶液按照15-17∶2-4∶1的體積比混合均勻，得到提高白酒丟糟水解性能的混合菌酶液；
步驟a中，所述以白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基的主要成分為：白酒丟糟1-1.3％，(NH4)2SO40.3-0.5％，MgSO40.04-0.06％，KH2PO40.1-0.15％，蛋白胨0.1-0.15％，NaCl0.05-0.07％；
步驟c中，所述以H菌酶解后的白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基的主要成分為：經(jīng)H菌酶液酶解后的白酒丟糟1-1.3％，(NH4)2SO40.3-0.5％，MgSO40.04-0.06％，KH2PO40.08-0.12％，蛋白胨0.1-0.15％，NaCl0.05-0.07％；
步驟e中，將H菌酶液和L菌酶液按3-5∶1的體積比混合后共同酶解白酒丟糟，所述以H菌酶液和L菌酶液共同酶解的白酒丟糟為碳源的篩選培養(yǎng)基的主要成分為：經(jīng)H菌酶液和L菌酶液共同酶解的白酒丟糟1-1.3％，(NH4)2SO40.3-0.5％，MgSO40.04-0.06％，KH2PO40.1-0.15％，蛋白胨0.1-0.15％，NaCl0.05-0.07％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水解白酒丟糟的混合菌酶液的制備方法，其特征在于：步驟b、d、f任一項(xiàng)中，采用固體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，活化菌樣的接種量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基的9-11％。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的水解白酒丟糟的混合菌酶液的制備方法，其特征在于：所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基由白酒丟糟與鹽溶液按照質(zhì)量體積比1∶1.3-1.7g/ml混合，所述鹽溶液的成分為：(NH4)2SO40.9-1.1％，NaNO31.9-2.1％、KH2PO40.9-1.1％、CaCl20.1-0.15％、MgSO40.1-0.15％，豆餅粉0.9-1.1％，其余為水。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水解白酒丟糟的混合菌酶液的制備方法，其特征在于：步驟b、d、f任一項(xiàng)中，浸提的方法為：將發(fā)酵后的菌樣與pH4.8-5.2的檸檬酸緩沖液按1∶9-11g/ml的質(zhì)量體積比混合后浸提。
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