[發明專利]米糠活性肽在干預秀麗隱桿線蟲衰老或肌肉損傷中的應用

在審

• 申請號: 202110981286.6
• 申請日: 2021-08-25
• 公開（公告）號: CN113616773A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 梁盈;吳釔心;林親錄;陳忠旭;蔡潔;吳偉
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: A61K38/08
• 分類號: A61K38/08;A61K38/01;A61P39/06;A61P21/00;A61K36/899
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 郭立中

本發明公開了米糠活性肽的新用途。本發明采用秀麗隱桿線蟲為模式生物，試驗了米糠活性肽對干預秀麗隱桿線蟲衰老和肌肉損傷的作用，結果發現多個濃度的米糠活性肽對秀麗隱桿線蟲有恢復肌肉損傷和延長壽命的作用。本發明闡釋了米糠活性肽新的藥理機制，為米糠活性肽的抗衰老以及修復肌肉損傷的應用提供了新的思路和手段。

技術領域

本發明涉及蛋白領域，特別涉及米糠活性肽在干預秀秀麗隱桿線蟲衰老或肌肉損傷上的應用。

背景技術

米糠蛋白有優良的營養價值，但隨著食物精細化，米糠成為了稻米加工過程的副產物。因此，對其進行深加工，對副產物進行增值再利用具有十分重要的意義。米糠活性肽是通過對米糠蛋白進行水解，從米糠中提取的具有一定生物活性的肽。米糠活性肽已經在清除體內活性氧、自由基及抗氧化方面取得了較好的效果。

秀麗隱桿線蟲（C.elegans）是當今世界唯一一個身體中所有細胞都能被逐個盤點歸類的生物，并且具有壽命短、身體透明易于觀察、飼養成本低、容易獲取大量同期化樣本、可長期保存、實驗可操作性強等優點，已經成為人們科研探索中常用的模式生物。

肌肉損傷是一種多見于老年人以及運動員的肌肉健康問題。它的特點是肌纖維橫截面積、肌核數目的減少；蛋白質含量、肌肉強度的下降等，它也關聯發病和死亡的風險增加。盡管進行了數十年的研究，但尚無有效的方法可預防肌肉質量下降。

經過查閱資料，未見我國有關于米糠活性肽對秀麗隱桿線蟲衰老或肌肉損傷的相關文獻研究，因此關于米糠活性肽在抗衰老或肌肉損傷方面的研究尚待探索。

發明內容

本發明的目的在于提供米糠活性肽在干預秀麗隱桿線蟲衰老或肌肉損傷中的應用，為米糠活性肽的進一步開發利用與推廣提供參考理論依據。

為實現上述目的，本發明的技術方案如下：

一種米糠活性肽在干預秀麗隱桿線蟲衰老或肌肉損傷上的應用，所述米糠活性肽序列為Lys-His-Asn-Arg-Gly-Asp-Glu-Phe。

所述的米糠活性肽干預線蟲肌肉損傷的具體技術方案如下：

游泳主要是對秀麗隱桿線蟲體壁肌肉進行表征，通過游泳來判斷米糠活性肽對體壁肌肉損傷的恢復作用。

實驗分空白組、米糠活性肽低劑量組（0.05mM）、米糠活性肽中劑量組（0.1mM）、米糠活性肽高劑量組（0.3mM），每組30條線蟲。L4期秀麗隱桿線蟲挑至含有10μM地塞米松的NGM平板中（control組不含地塞米松）。地塞米松屬于一種糖皮質激素。在這里我們將地塞米松作為一種構建肌肉損傷模型的損傷物。地塞米松作為構建肌肉損傷相關模型的藥物最常見應用于細胞模型上，在近年來發表的文獻中也有在小鼠上進行應用的。在實驗過程中，我們以線蟲的運動能力發生變化來評價造模的效果，為了證明其效果，我們從多個不同行為學指標來進行綜合的判定，確定造模的成功。在造模過程中，為了說明該物質是造成一個群體范圍的普遍損傷，因此我們不會選擇性地挑選個別線蟲。在20度下培養36h后，將線蟲按組挑至只加了M9緩沖液的NGM平板中，其中M9緩沖液的配方如下：以1L計算，其中含有5g氯化鈉、3g磷酸二氫鉀、6g磷酸氫二鈉、0.12g硫酸鎂。每組30條，待線蟲適應5min后，將皿放置在熒光倒置顯微鏡下，40倍鏡下用設備自帶的攝像功能錄制30s的視頻，期間手動控制載物臺操縱桿跟蹤秀麗隱桿線蟲的游泳。記錄線蟲游泳的頻率，數據分析后繪圖。游泳的頻率計次按照其身體前半部分從左邊搖晃到右邊再晃回左邊記為一次。

咽泵主要是對秀麗隱桿線蟲咽部肌肉進行表征，通過咽泵來判斷米糠活性肽對肌肉損傷的恢復作用。