[發(fā)明專利]趨化因子作為玫瑰痤瘡診斷的分子標(biāo)志物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110978624.0
• 申請(qǐng)日: 2021-08-25
• 公開（公告）號(hào): CN113462770B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫艷;吳嚴(yán);陳良宏;喬帥;肖碧環(huán);王敬玉;褚海濤;程銘;高興華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;G01N33/68;G01N33/577;A61K45/00;A61P17/10
• 代理公司: 沈陽(yáng)亞泰專利商標(biāo)代理有限公司 21107
• 代理人: 史力伏

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種趨化因子作為玫瑰痤瘡相關(guān)分子標(biāo)志物在其診斷、治療中的應(yīng)用。LL?37誘導(dǎo)造成的玫瑰痤瘡動(dòng)物中TLR2及趨化因子CCL5、CXCL9、CXCL10及CXCL11的表達(dá)升高，AhR激動(dòng)劑本維莫德可以減輕紅斑及炎細(xì)胞浸潤(rùn)，并降低TLR2及上述趨化因子的表達(dá)。LL?37誘導(dǎo)造成的玫瑰痤瘡細(xì)胞模型中TLR2及趨化因子CCL5、CXCL9、CXCL10及CXCL11的表達(dá)升高，AhR激動(dòng)劑本維莫德可以降低TLR2及上述趨化因子的表達(dá)；上調(diào)TLR2可以引起該細(xì)胞模型中上述趨化因子的表達(dá)升高，而AhR激動(dòng)劑本維莫德可以通過(guò)下調(diào)TLR2的表達(dá)而降低上述趨化因子的表達(dá)。趨化因子CCL5、CXCL9、CXCL10及CXCL11有望成為新的玫瑰痤瘡疾病診斷指標(biāo)或治療靶點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種趨化因子作為玫瑰痤瘡相關(guān)分子標(biāo)志物在其診斷、治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

趨化因子是小分子量（8-14kd）的分泌性蛋白，有趨化活性，在免疫穩(wěn)態(tài)的維持及炎癥反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。趨化因子根據(jù)結(jié)構(gòu)不同分為4個(gè)亞型，包括CC、CXC、C及CX3C，通過(guò)與同源細(xì)胞表面趨化因子受體相互作用而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。目前發(fā)現(xiàn)的趨化因子約50種，主要參與白細(xì)胞發(fā)育、分化及遷移，也在炎癥性疾病、血管形成及創(chuàng)傷修復(fù)中有重要作用。

芳香烴受體（AhR）可以與環(huán)境中的多環(huán)芳香族碳?xì)浠衔锛岸f英等相結(jié)合，通過(guò)產(chǎn)生大量的活性氧簇引起氧化應(yīng)激反應(yīng)。AhR還是光源性色團(tuán)、植物素及微生物副產(chǎn)物等很多內(nèi)外源性配體的受體，很多AhR配體可以通過(guò)激活抗氧化轉(zhuǎn)錄因子NRF2而產(chǎn)生抗氧化作用。AhR-CYP1A1介導(dǎo)的氧化應(yīng)激可以促進(jìn)IL1、IL6及IL8等多種前炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

玫瑰痤瘡是一種發(fā)生于顏面中部的慢性炎癥性皮膚病，全球人群發(fā)病率約5.5%。其確切的病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與固有免疫功能異常、適應(yīng)性免疫功能異常、神經(jīng)脈管調(diào)節(jié)功能異常及皮膚屏障功能異常有關(guān)。由于發(fā)生于面部，本病除了對(duì)患者生理造成一定影響，部分患者還會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的心理問(wèn)題。玫瑰痤瘡病理表現(xiàn)以血管、毛囊及皮脂腺周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn)為主。傳統(tǒng)的治療方法包括系統(tǒng)應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、硝基咪唑類、維A酸類等藥物，外用甲硝唑、壬二酸、伊維菌素等，各種光、激光的治療及手術(shù)治療。目前玫瑰痤瘡的診斷缺乏特異性的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，而且因?yàn)殡y治易反復(fù)，本病一直受到專家學(xué)者的廣泛關(guān)注，新的診斷及治療手段亟待開發(fā)。我們前期通過(guò)生物信息學(xué)分析，找到玫瑰痤瘡患者皮損與正常皮膚組織的差異基因，包括TLR2及趨化因子CCL5、CXCL9、CXCL10、CXCL11，它們?cè)诿倒屦畀徎颊咂p中表達(dá)均升高。此外，有研究表明，TLR2在玫瑰痤瘡患者皮損中高表達(dá)，但TLR2是否通過(guò)上調(diào)上述趨化因子的表達(dá)促進(jìn)玫瑰痤瘡的發(fā)病尚不清楚。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)目前玫瑰痤瘡尚無(wú)特異性實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)，本發(fā)明的目的在于提供一種趨化因子作為玫瑰痤瘡診斷的分子標(biāo)志物的應(yīng)用。通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AhR激動(dòng)劑本維莫德可以緩解上述情況，并通過(guò)下調(diào)TLR2的表達(dá)而降低上述趨化因子的表達(dá)。因此，趨化因子CCL5、CXCL9、CXCL10及CXCL11有望成為新的玫瑰痤瘡疾病診斷指標(biāo)或治療靶點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案。

本發(fā)明提供一種趨化因子基因或其編碼蛋白的表達(dá)水平的檢測(cè)試劑在制備用于玫瑰痤瘡輔助診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述趨化因子包括如下一種或幾種的組合：CCL5、CXCL9、CXCL10和CXCL11。

進(jìn)一步地，所述趨化因子基因或其編碼蛋白在玫瑰痤瘡中呈現(xiàn)高表達(dá)。

進(jìn)一步地，所述產(chǎn)品通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR、實(shí)時(shí)定量PCR、芯片、高通量測(cè)序平臺(tái)、免疫組織化學(xué)染色或酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)樣本中趨化因子基因或其編碼蛋白的表達(dá)水平。

進(jìn)一步地，所述產(chǎn)品中含有擴(kuò)增趨化因子基因的特異性引物、與趨化因子基因核苷酸序列雜交的探針或與趨化因子蛋白特異性結(jié)合的抗體。