[發明專利]鑒別石仙桃的試劑盒和方法

有效

• 申請號: 202110976314.5
• 申請日: 2021-08-24
• 公開（公告）號: CN113652496B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 梅志強;王愷;付俊江;李春紅
• 申請（專利權）人: 西南醫科大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 張娟;魏靜

本發明公開了一種鑒別石仙桃的試劑盒和方法，屬于基因檢測領域。該試劑盒包括檢測SEQ?ID?NO.1所示序列的試劑。本發明首次發現SEQ?IDNO.1所示核苷酸序列為石仙桃特異性序列，通過檢測這個序列可以準確鑒定待檢樣本是否為石仙桃，區分石仙桃與石斛以及其他品種的藥物植物，為藥材的合理使用提供指導。本發明提供的試劑盒可以準確、有效的鑒別石仙桃，特異性強。本發明提供的鑒別方法操作簡便，耗時短，測試準確度高，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于基因檢測領域，具體涉及一種鑒別石仙桃的試劑盒和方法。

背景技術

石斛(學名：Dendrobium?nobile?Lindl)，又名仙斛蘭韻、不死草、還魂草、紫縈仙株、吊蘭等。莖直立，肉質狀肥厚，稍扁的圓柱形，長10～60厘米，粗達1.3厘米。藥用植物，性味甘淡微咸，寒，歸胃、腎，肺經。益胃生津，滋陰清熱。用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。石斛為較常用中藥。始載于《神農本草經》，列為上品。本品其性味甘，微寒。歸胃，腎經。具有益胃生津，滋陰清熱的功能，主治陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。根據(2000)年版藥典中所記載石斛的品種包含銅皮石斛、黑毛石斛、玫瑰石斛、鐵皮石斛、金釵石斛等。

因近年石斛藥用、保健用量增加，市場價格一路攀升，導致不法藥商以偽充真。中藥市場藥檢發現有人把蘭科植物石仙桃(Pholidota?chinensis?Lindl.)的假鱗莖洗凈切段，并在外表染上黃綠色，混充石斛入藥，使得飲片性狀與正品混淆，無法區分。石仙桃和石斛均屬于蘭科，都是多年常綠附生草本植物，石仙桃為蘭科植物石仙桃屬植物石仙桃的干燥根莖。石仙桃具有養陰、清肺、利濕、消瘀的功效，用于眩暈、頭痛、咳嗽、吐血、夢遺、痢疾、白帶、疳積，其與石斛功效有差異，兩者不能混用。

目前鑒別石仙桃的方法多為肉眼觀察或者生化試劑鑒定，但準確率難以保證。因此，開發出一種能夠方便、快速、準確的鑒別出石仙桃的方法具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種方便、快速、準確的鑒別石仙桃的試劑盒和方法。

本發明提供了一種鑒別石仙桃的試劑盒，所述試劑盒包括檢測SEQ?ID?NO.1所示序列的試劑。

進一步地，所述檢測SEQ?ID?NO.1所示序列的試劑包括擴增SEQ?ID?NO.1所示序列的引物對。

進一步地，所述擴增SEQ?ID?NO.1所示序列的引物對為SEQ?ID?NO.5和SEQ?IDNO.6所示的PCR引物對。

本發明還提供了一對用于檢測石仙桃基因的引物對，所述引物對能夠擴增SEQ?IDNO.1所示的序列。

進一步地，所述引物對為SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6所示的PCR引物對。

本發明還提供了一種鑒別石仙桃的方法，所述方法包括以下步驟：

(1)提取待檢樣本的DNA；

(2)檢測待檢樣本的DNA中是否含有SEQ?ID?NO.1所示序列，如果含有則判斷待檢樣本是石仙桃，否則判斷待檢樣本不是石仙桃。

進一步地，步驟(2)為：利用SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6所示的PCR引物對擴增待檢樣本的DNA，如果能夠擴增出SEQ?ID?NO.1所示序列則判斷待檢樣本是石仙桃，如果不能夠擴增出SEQ?ID?NO.1所示序列則判斷待檢樣本不是石仙桃。

本發明還提供了上述試劑盒在鑒別石仙桃中的用途。

本發明還提供了上述引物對在鑒別石仙桃中的用途。