[發明專利]鑒定四臣止咳顆粒中有效成分的方法

有效

• 申請號: 202110974962.7
• 申請日: 2021-08-24
• 公開（公告）號: CN113640440B
• 公開（公告）日: 2023-10-27
• 發明（設計）人: 尼瑪次仁;曲玉霞;張晨寧;崔爽;莫歌;孫毅坤;張碩峰
• 申請（專利權）人: 西藏藏醫藥大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙麗婷

1.一種鑒定四臣止咳顆粒中有效成分的方法，其特征在于，包括如下步驟：

獲得四臣止咳顆粒樣品溶液；

采用液相色譜-質譜法對所述四臣止咳顆粒樣品溶液進行分析，基于所得到的液相色譜結果確定所述四臣止咳顆粒中有效成分；

所述液相色譜的色譜條件中采用的流動相包括：

流動相A，所述流動相A選自甲酸水溶液；

流動相B，所述流動相B選自乙腈。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述有效成分包含檸檬酸、熊果苷、沒食子酸、3-羧基-4-羥基苯氧基葡萄糖苷、拉馬爾比德苷、新綠原酸、胡麻屬苷、巖白菜素、6-O-沒食子酰熊果苷、草木犀酸、山梔苷甲酯、綠原酸、兒茶素、隱綠原酸、阿夫兒茶精、異綠原酸B、蘆丁、芹糖-葡萄糖甘草苷、11-O-沒食子酰巖白菜素、8-O-乙酰山梔苷甲酯、連翹酯苷B、牡荊素、芹糖甘草苷、兒茶素-3-O-沒食子酸酯、甘草苷、甘草素、毛蕊花糖苷、1,3-二咖啡酰奎寧酸、糙蘇素、異綠原酸A、異類葉升麻苷、1,4-二咖啡酰奎寧酸、6’-乙酰甘草苷、異綠原酸C、柚皮苷-O-葡萄糖苷、甘草苷元-7-O-芹糖-4’-O-葡萄糖苷、芹糖異甘草苷、黃甘草苷、異甘草苷、1，5-二咖啡酰奎寧酸、新高草甘、甘草苷D2、6-去氧甲基茵陳色原酮、木犀草素、槲皮素、甘草酸J2、24-羥基-甘草皂苷A3、烏拉爾甘草皂苷F、二羥基甘草次酸、甘草皂苷A3、22-乙酰氧甘草甜素羅亞甘草甜素、云加寧-B1云加寧二糖、22-乙酰氧基甘草甜素、芒柄花苷、茵陳色原酮、甘草皂苷G2、24-羥基-甘草皂苷E2、羥基甘草酸、異甘草素、甘草皂苷F3、羥基甘草酸、甘草皂苷E2、刺芒柄花素、羥基甘草酸、22-乙酰氧基甘草C2、甘草酸、甘草皂苷B2、22-去羥基烏拉爾甘草皂苷C、羅亞甘草甜素、甘草皂苷E2、甘草皂苷D3、甘草皂苷H2、云加寧-B1、甘草皂苷K2、甘草皂苷J2、甘草苯并呋喃、甘草皂苷C2、甘草黃酮醇A、甘草香豆素、薊黃素、異甘草黃酮醇、4-O-甲基光甘草定、甘草酚、烏拉爾寧、甘草利酮、甘草異黃酮B、康唑磷、甘草次酸。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述甲酸水溶液的濃度為0.05～0.2體積％。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述色譜條件中采用的色譜柱為C18，所述液相色譜采用的流速為0.2-0.5mL/min，柱溫為20-30℃，進樣體積為2μL。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述色譜條件中采用梯度洗脫程序為：

6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述質譜的條件如下：

電離模式為：電噴霧電離，正負離子交替掃描；

掃描模式為：Full scan/ddMS2，質量掃描范圍m/z 100-1500Da；

毛細管溫度300-400℃，正離子模式噴霧電壓3.5KV，負離子模式噴霧電壓2.5KV，鞘氣N2：35arb，輔助氣N2：10arb；

采用30V、50V、70V的3種碰撞能量對母離子進行二級碎裂；

一級質譜分辨率：Full Scan 70000FWHM，二級質譜分辨率：MS/MS17500 FWHM。

7.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述四臣止咳顆粒樣品溶液的制備方法包含如下步驟：

將四臣止咳顆粒研磨后加水溶解，離心取上清液，得到所述四臣止咳顆粒樣品溶液。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述離心的次數至少為兩次，收集并合并每次離心所得上清液；

任選地，所述離心是在10000-15000r/min的轉速下進行10-20min。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述四臣止咳顆粒的質量g與水的體積mL比為1：3-7。

10.根據權利要求1-9任一項所述的方法，其特征在于，所述有效成分的保留時間、母離子和碎片離子見下表：