[發明專利]利用光合細菌菌系高效降解煉油廢水中污染物的方法

有效

• 申請號: 202110965540.3
• 申請日: 2021-08-23
• 公開（公告）號: CN113651431B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 李相昆;孫鈺潔
• 申請（專利權）人: 河北工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/38;C12R1/01;C02F103/36;C02F101/16
• 代理公司: 天津翰林知識產權代理事務所(普通合伙) 12210
• 代理人: 付長杰

1.一種利用光合細菌菌系高效降解煉油廢水中污染物的方法，其特征在于，所述光合細菌菌系包括紅假單胞菌(Rhodopseudomonas)和假單胞菌(Pseudomonas)，二者質量比為(0.8～1.2):1；將光合細菌菌系加入煉油廢水中，并在光照、厭氧條件下進行培養；

所述方法包括以下步驟：

(1)取5g湖泊中能被陽光直射到的缺氧區的泥土，放置于100mL量筒中，加入已經滅菌的富集培養基至95mL，再加入5mL液體石蠟，放置培養箱中，培養溫度30℃，光強3000～4000lux，培養7天，待土壤表面有紅色細菌附著，培養基由無色變為紅色，取5mL液體移至新的培養基中，反復富集至顏色變為紫紅色或深紅色為止；

(2)取富集完成的培養液0.2mL均勻涂布在改良的RCVBN固體培養基上，菌液風干后倒入液體石蠟隔絕氧氣，放置培養箱中在30℃、光強3000～4000lux培養，先生長假單胞菌(Pseudomonas)，再生長紅假單胞菌(Rhodopseudomonas)，待固體培養基表面有紅色細菌時，此時紅假單胞菌(Rhodopseudomonas)和假單胞菌(Pseudomonas)同時存在，挑取含這兩種菌種的菌落在新的培養基中劃線，重復上述操作，直到紅色菌落占大多數；

(3)光合細菌菌系的擴大培養采用改良的RCVBN培養基，取10mL培養基放入試管，121℃高溫滅菌20min，從固體培養基中挑取步驟(2)獲得的混菌菌落接種到試管中，置于搖床內，30℃，120rpm培養3天，之后接種到已滅菌的含有30mL培養基的50mL錐形瓶內，30℃，120rpm培養3天，重復以上培養過程，直至獲得所需的菌液量，此時紅假單胞菌和假單胞菌二者相對豐度均為39-42％；

(4)將步驟(3)擴大培養后得到的菌液再轉接一代，保證兩代菌液微生物群落一致，獲得微生物穩定的菌液；

(5)將煉油廢水稀釋10-15倍，使煉油廢水能夠透光，稀釋后調節煉油廢水的pH值為6.5-7.5，將微生物穩定的菌液以30％接種量接種至稀釋后的煉油廢水中，在400～1000lux光強下30℃厭氧培養，處理時間為3-15天，監測廢水中污染物指標變化和菌體中類胡蘿卜素、細菌葉綠素和輔酶Q₁₀的含量變化，回收類胡蘿卜素、細菌葉綠素或輔酶Q₁₀；

所述煉油廢水中含有酚類和烴類，不含葡萄糖、蔗糖類、醇類營養類物質，煉油廢水指標為：COD：15000-20000mg/L，NH₄⁺-N：600-800mg/L，NO₃^--N：150-180mg/L，NO₂^--N：20-25mg/L，色度：大于10000；

SCOD、氨氮去除率分別達到了60％和90％以上，氨氮出水濃度低于7mg/L；硝態氮出水低于6mg/L；未檢測出亞硝態氮；在去除煉油廢水中污染物的同時，菌體細胞中類胡蘿卜素最大含量和產量為分別高于5mg/L和10mg/g-DCW，細菌葉綠素最大含量和產量分別為高于3mg/L和5mg/g-DCW；輔酶Q₁₀含量和產量分別為高于4.5mg/L和9.5mg/g-DCW。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，紅假單胞菌(Rhodopseudomonas)和假單胞菌(Pseudomonas)的質量比為1:1。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述煉油廢水的pH值為6.5-7.5。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述煉油廢水指標還包括電導率，電導率：3-5mS/cm。