[發明專利]一種基于基因組學途徑快速鑒定調控油菜含油量基因的方法及其應用

在審

• 申請號: 202110963077.9
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113667731A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 黃會斌;周永明;趙青;穆罕默德·沙希徳;柯昌森;蔡光勤;王學敏;范楚川
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12Q1/6869
• 分類號: C12Q1/6869;C12Q1/6895;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/20
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 張曉博

1.一種基于基因組學途徑快速鑒定調控油菜含油量基因的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：將高含油量油菜材料與低含油量油菜材料不同發育時期的角果進行轉錄組測序；

S2：對轉錄組測序結果進行分析，篩選表達差異基因；

S3：將差異基因在qOC-A5 QTL位點進行掃描，鑒定出調控油菜種子含油量的基因；

S4：對鑒定出的基因的功能進行驗證。

2.根據權利要求1所述的一種基于基因組學途徑快速鑒定調控油菜含油量基因的方法，其特征在于：所述高含油量油菜材料包括高含油量近交系1L99；所述低含油量油菜材料包括低含油量近交系1L363。

3.根據權利要求1所述的一種基于基因組學途徑快速鑒定調控油菜含油量基因的方法，其特征在于：步驟S4中利用CRISPR技術構建基因突變體，檢測突變體材料含油量的變化。

4.根據權利要求1所述的一種基于基因組學途徑快速鑒定調控油菜含油量基因的方法，其特征在于：鑒定出的調控油菜種子含油量的基因包括BnECH.A5。

5.一種調控油菜種子含油量的方法，其特征在于：敲除或降低油菜材料中BnECH.A5基因的表達，提高油菜種子含油量。

6.根據權利要求5所述的一種調控油菜種子含油量的方法，其特征在于：利用CRISPR/Cas9介導的基因敲除技術敲除或降低油菜材料中BnECH.A5基因的表達。

7.根據權利要求6所述的一種調控油菜種子含油量的方法，其特征在于：CRISPR/Cas9技術中涉及2個靶標序列，分別為：T1：GCTGGTGTTGAAAGAGGAGACGG；T2：TCGTCACTATCAAACCAAAACGG。

8.根據權利要求7所述的一種調控油菜種子含油量的方法，其特征在于：所述2個靶標序列的基因編輯引物分別為：T1-F：GTCAGCTGGTGTTGAAAGAGGAGA；T1-R：AAACTCTCCTCTTTCAACACCAGC；T2-F：GTCATCGTCACTATCAAACCAAAA；T2-R：AAACTTTTGGTTTGATAGTGACGA。

9.根據權利要求7所述的一種調控油菜種子含油量的方法，其特征在于：構建靶標基因編輯載體，并轉化至受體材料中，獲得油菜種子含油量提高的突變體材料。

10.BnECH.A5基因在調控油菜種子含油量中的應用。