[發明專利]小RNA miR-30a-5p在修復脊髓損傷方面的應用

在審

• 申請號: 202110963055.2
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113662956A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 姚淳;龔蕾蕾;李勝龍;于彬;顧曉松
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: A61K31/7105
• 分類號: A61K31/7105;A61P25/00;A61P25/28
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

本發明屬于生物醫藥技術領域，本發明公開了小RNA miR?30a?5p在制備治療與細胞成血管、細胞遷移相關疾病藥物中的應用。小RNA miR?30a?5p的RNA序列如SEQ ID No：1所示。其中所述小RNA miR?30a?5p為分子干預靶點。所述細胞成血管、細胞遷移有關疾病為神經損傷。優選的，所述神經損傷為脊髓損傷。本發明還公開了小RNA miR?30a?5p在修復脊髓損傷方面的應用。本發明中，小RNAmiR?30a?5p作為分子干預靶點，上調或過表達miR?30a?5p，能夠顯著促進血管內皮細胞的成血管和遷移能力，進而有利于脊髓損傷后的功能修復。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，尤其涉及小RNA miR-30a-5p在修復脊髓損傷方面的應用，具體涉及小RNA miR-30a-5p在制備治療與細胞成血管、細胞遷移相關疾病藥物中的應用、小RNA miR-30a-5p在修復脊髓損傷方面的應用。

背景技術

脊髓損傷是一個復雜的生理病理過程。損傷局部血管網絡遭受破壞，血-脊髓屏障通透性發生改變，加劇炎癥反應。雖然損傷微環境中存在血管新生，但新生血管密度低且功能不完全；阻礙受損軸突的再生和功能恢復。尋找合適的手段干預脊髓損傷后的血管反應，促進功能性的血管新生和重塑，恢復血-脊髓屏障，將改善損傷微環境，有利于脊髓的損傷修復。microRNA（miRNA）是一類小的非編碼RNA，可以通過結合靶基因mRNA的 3’-UTR，導致mRNA降解或翻譯抑制，引起基因沉默，參與多種生物學過程。目前的研究發現miRNA可能也參與了脊髓損傷后的病理過程，包括炎癥反應、細胞存活等。但有關miRNA對于脊髓損傷后血管新生的影響研究甚少。

發明內容

發明目的：針對現有技術中存在問題或不足，本發明提供一種小RNA miR-30a-5p在制備治療與細胞成血管、細胞遷移相關疾病藥物中的應用、小RNA miR-30a-5p在修復脊髓損傷方面的應用。

為實現上述發明目的，本發明的實施例提供小RNA miR-30a-5p在制備治療與細胞成血管、細胞遷移相關疾病藥物中的應用。

進一步的，小RNA miR-30a-5p的RNA序列如SEQ ID No：1所示。

進一步的，所述小RNA miR-30a-5p為分子干預靶點。

進一步的，所述細胞成血管、細胞遷移有關疾病為神經損傷。

優選的，所述神經損傷為脊髓損傷。

本發明的實施例還提供一種小RNA miR-30a-5p在修復脊髓損傷方面的應用，其特征在于，包括以下步驟：

S1、制備大鼠脊髓砸傷模型；觀察大鼠脊髓損傷后miR-30a-5p的表達情況；

S2、HUVECs成血管實驗，觀察 miR-30a-5p對HUVECs成血管的影響；

S3、Transwell遷移實驗及劃痕實驗，觀察miR-30a-5p對HUVECs遷移的影響。

進一步的，所述步驟S1具體包括以下過程：

S1.1、大鼠脊髓砸傷模型：選取健康成年雌性SPF級SD大鼠，體重250 g±10 g，按照0 d、1 d、3 d、7 d四個時間點進行隨機分組，每組10只大鼠；進行砸傷實驗；

S1.2、脊髓組織取材：取T10損傷段上下共10 mm長度的脊髓置于預冷的RNA-Free的凍存管中，再將凍存管放入液氮中運輸，-80℃保存；

S1.3、脊髓組織RNA提取：

S1.3.1、向凍存管中加入500 μl Trizol溶液，用電動勻漿器將組織破碎勻漿后再加入500 μl Trizol溶液，然后冰上靜置裂解5~10 min；