[發(fā)明專利]一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基及其制備方法

在審

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• 申請日: 2021-08-19
• 公開（公告）號: CN113684149A
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發(fā)明（設計）人: 顧瑞霞;瓦云超;張臣臣;陳大衛(wèi);關成冉;彭奎耀;呂田;瞿恒賢
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/14;C12P19/04;C08B37/00;C12R1/46
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 沈志海

本發(fā)明涉及一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基及其制備方法，所述培養(yǎng)基包括1種碳水化合物、9~20種游離氨基酸、6種維生素、6種無機鹽及3種有機鹽、去離子水；本發(fā)明公開了一種適合嗜熱鏈球菌快速生長且能提升其游離胞外多糖產量的化學成分確定的培養(yǎng)基配方，還公開了上述培養(yǎng)基在篩選產游離胞外多糖嗜熱鏈球菌中的應用。本發(fā)明設計的培養(yǎng)基能嗜熱鏈球菌游離胞外多糖產量，且對產游離胞外多糖嗜熱鏈球菌具有優(yōu)良的區(qū)分度，分離步驟簡便，得到的游離胞外多糖純度高。

技術領域

本發(fā)明涉及一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基及其制備方法，屬于生物技術領域。

技術背景

乳酸菌產生的食品級胞外多糖(EPS)被認為具有多種理化及生理功能。根據EPS所處的位置可將EPS分為附著在細菌表面的莢膜多糖(CPS)和分泌到環(huán)境中的游離多糖EPS(Free-EPS，f-EPS)研究表明，f-EPS可改善發(fā)酵乳粘度、脫水縮合敏感性、硬度、感官特性以及流變特性，賦予產品良好的柔滑口感，同時，f-EPS還能夠降低穩(wěn)定劑的使用量，降低生產成本。此外，最近的研究表明，f-EPS具有免疫調節(jié)、抗腫瘤等功能，還可能成為腸道菌群的益生元，因而受到乳制品行業(yè)的廣泛關注。嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus，S.thermophilus)是酸奶的主要發(fā)酵劑，也是發(fā)酵乳制品中應用最廣泛的細菌之一。多數嗜熱鏈球菌在生長過程中能夠產生游離胞外多糖(free EPS，f-EPS)，一般而言，嗜熱鏈球菌在脫脂乳培養(yǎng)基中的f-EPS產量約為50～400μg/mL。

嗜熱鏈球菌的生長需要多種的營養(yǎng)素，因此常用M17或脫脂乳這類含復雜有機營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基來培養(yǎng)嗜熱鏈球菌，以保證嗜熱鏈球菌快速生長。脫脂乳培養(yǎng)基是最常用于嗜熱鏈球菌f-EPS分離的培養(yǎng)基，嗜熱鏈球菌在脫脂乳培養(yǎng)基中往往能產生更多的f-EPS，但從發(fā)酵乳中分離f-EPS是一個繁瑣復雜的過程，并且有損失大量EPS的風險。使用等復雜的培養(yǎng)基(如M17等)時，f-EPS分離過程相對簡單，但M17培養(yǎng)基中含有大量的干擾成分(如，酵母提取物含有酵母多糖，大豆蛋白胨中可能含有大豆多糖)，這些成分會導致f-EPS產量被過高的評估或是對f-EPS化學性質錯誤評價。

如果能夠開發(fā)出一款能夠支持嗜熱鏈球菌快速生長、便于游離胞外多糖分離且分離純度高的培養(yǎng)基，將會大大促進游離胞外多糖的量效及構效關系研究。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的就是針對上述現有技術的缺陷，提供能夠支持嗜熱鏈球菌快速生長和提升游離胞外多糖產量的化學確定培養(yǎng)基及其應用，本發(fā)明設計的化學確定培養(yǎng)基能夠不引入復雜有機成分，支持嗜熱鏈球菌快速生長，提升游離胞外多糖產量，提高分離純度和效率，能夠作為篩選、分離純化游離胞外多糖的嗜熱鏈球菌培養(yǎng)基，具體為一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基及其制備方法。

本發(fā)明的目的是這樣實現的：一種適合嗜熱鏈球菌培養(yǎng)及游離胞外多糖測定的化學成分確定培養(yǎng)基，其特征在于，所述的培養(yǎng)基包括1種碳水化合物、9～20種游離氨基酸、6種維生素、6種無機鹽及3種有機鹽、離子水；

所述碳水化合物包括乳糖，其中，乳糖占培養(yǎng)基重量的1～4％；