[發明專利]長鏈非編碼RNA及特異性干擾長鏈非編碼RNA表達的siRNA的應用

在審

• 申請號: 202110954306.0
• 申請日: 2021-08-19
• 公開（公告）號: CN113652483A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 殷欣;胡可適;陸申新;張鋒;劉文鳳
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/113;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 褚明偉

1.一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌預后評估試劑中的應用，其特征在于，所述長鏈非編碼RNA是LINC00601，基因序列如SEQ ID No.1所示。

2.根據權利要求1所述的一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌預后評估試劑中的應用，其特征在于，所述長鏈非編碼RNA應用于制備肝癌奧沙利鉑治療療效評估試劑。

3.一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌預后評估試劑盒中的應用，其特征在于，所述的長鏈非編碼RNA是LINC00601，基因序列如SEQ ID No.1所示。

4.根據權利要求3所述的一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌預后評估試劑盒中的應用，其特征在于，所述長鏈非編碼RNA應用于制備肝癌奧沙利鉑治療療效評估試劑盒。

5.根據權利要求3所述的一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌預后評估試劑盒中的應用，其特征在于，所述試劑盒中還含有說明書，說明書記載內容：長鏈非編碼RNA對肝癌預后評估的方法為：

(1)采集樣本及RNA抽提：采集樣本并使用純化試劑盒提取樣本中的總RNA，

(2)反轉錄成cDNA：配置反轉錄反應體系，進行反轉錄反應得到cDNA，

(3)LINC00601的q-PCR定量檢測：配置q-PCR反應體系，利用熒光定量PCR儀進行熒光定量檢測，

步驟(1)中，所述樣本包括組織樣本、細胞樣本；

步驟(2)中，所述反轉錄反應體系為：5μL 4×EZscript RT Mix II，1μg總RNA，并用DEPC水將反應體系補足至20μL；反應過程為：42℃15min，85℃10sec；

步驟(3)中，所述q-PCR反應體系為：

2×SYBR Green qPCR Master Mix(ROX2 plus) 10μL

正反PCR引物 10μM各0.4μL

反轉錄cDNA 4μL

ddH₂O 5.2μL

總反應體系 20μL；

反應過程為：

熱啟動酶活化：95℃×5min；

PCR擴增：95℃×10sec→60℃×30sec：共40cycle；

溶解曲線檢測：95℃×15sec→60℃×1min→95℃×30sec→60℃×15sec。

6.一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌治療藥物中的應用，其特征在于，所述的長鏈非編碼RNA是LINC00601，基因序列如SEQ ID No.1所示。

7.根據權利要求6所述的一種長鏈非編碼RNA在制備肝癌治療藥物中的應用，其特征在于，所述長鏈非編碼RNA應用于制備耐奧沙利鉑肝癌細胞治療藥物。

8.一種特異性干擾長鏈非編碼RNA表達的siRNA，其特征在于，所述siRNA選自基因序列如SEQ ID No.4所示的siRNA1、如SEQ ID No.5所示的siRNA2或如SEQ ID No.6所示的siRNA3。

9.一種特異性干擾長鏈非編碼RNA表達的siRNA在制備肝癌治療藥物中的應用，其特征在于，所述siRNA如權利要求8所述。

10.根據權利要求9所述的一種特異性干擾長鏈非編碼RNA表達的siRNA在制備肝癌治療藥物中的應用，其特征在于，所述siRNA應用于制備耐奧沙利鉑肝癌細胞治療藥物。