[發明專利]生物標志物在診斷食管癌中的應用

有效

• 申請號: 202110941973.5
• 申請日: 2021-08-17
• 公開（公告）號: CN113637754B
• 公開（公告）日: 2023-10-27
• 發明（設計）人: 張良祿;周俊;董蘭蘭;吳志誠;熊楊輝;萬康康;李婷婷
• 申請（專利權）人: 武漢艾米森生命科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 林青中

1.用于檢測NID2 CpG島區域甲基化水平的試劑在制備食管癌診斷試劑盒中的應用；

定義所述區域1～8依次為Chr14：52069986-52069893、Chr14:52069730-52069566、Chr14:52069392-52069280、Chr14：52069253-52069092、Chr14:52069014-52068828、Chr14:52068656-52068530、Chr14:52068539-52068399、Chr14：52068334-52068100所示的負鏈區域；

所述NID2 CpG島區域為a)～c)中的任一種：

a)區域6和/或區域7；

b)區域1、2、3、4、5、8與a)區域的組合；

c)包含a)區域或b)區域甲基化位點的其他區域。

2.根據權利要求1所述的應用，所述試劑通過如下方法中的一種或幾種實現對目標區域的檢測：

甲基化特異性PCR、亞硫酸氫鹽測序法、甲基化特異性微陣列法、全基因組甲基化測序法、焦磷酸測序法、甲基化特異性高效液相層析法、甲基化特異性高分辨率溶解曲線法、甲基化敏感性限制性內切酶法和熒光定量法。

3.根據權利要求2所述的應用，所述試劑包括引物，所述區域1～8所對應的引物依次如SEQ ID NO：1～2、SEQ ID NO：4～5、SEQ ID NO：7～8、SEQ ID NO：10～11、SEQ ID NO：13～14、SEQ ID NO：16～17、SEQ ID NO：19～20、SEQ ID NO：22～23所示。

4.根據權利要求3所述的應用，所述試劑還包括DNA提取試劑、擴增緩沖液、雙鏈特異性熒光染料、dNTP、Mg²⁺、DNA聚合酶、陽性對照、陰性對照、水以及亞硫酸鹽定序試劑中的至少一種。

5.根據權利要求3或4所述的應用，所示試劑還包括探針。

6.根據權利要求5所述的應用，所述區域1～8所對應的探針依次如SEQ ID NO：3、SEQID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQID NO：24所示。

7.根據權利要求6所述的應用，所述探針均為自身淬滅探針。

8.權利要求3中所定義的引物。

9.引物和探針組合產品，其包括權利要求3中所定義的引物，以及權利要求6或7中所定義的探針。

10.試劑盒，其包含權利要求3～7任一項中所定義的試劑。