[發明專利]一組不結球白菜早抽薹的分子標記引物及其應用

有效

• 申請號: 202110941003.5
• 申請日: 2021-08-17
• 公開（公告）號: CN113755623B
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發明（設計）人: 劉同坤;徐新鳳;李竹帛;張昌偉;李英;侯喜林;王建軍
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一組不結球白菜早抽薹的分子標記引物及其應用，屬于分子生物學技術領域。所述分子標記引物的序列如SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示，以不結球白菜DNA為模板，通過聚合酶鏈式反應擴增該片段，根據目的條帶的有無，可篩選出不結球白菜早抽薹品種或材料。本發明提供的分子標記引物，可以快速檢測不結球白菜早抽薹的品種和材料，極大的節約時間和資源，大大提高選擇效率，從而加快育種進程。

技術領域

本發明屬于分子生物學技術領域，具體涉及一組不結球白菜早抽薹的分子標記引物及其應用。

背景技術

不結球白菜（ Brassica?campestris?ssp .?chinensis?Makino）屬十字花科蕓薹屬蕓薹種白菜亞種，又名青菜、小白菜、油菜等，是我國長江中下游及其以南地區的一種四季栽培的蔬菜。不結球白菜質地鮮嫩，營養豐富，深受人們喜愛，在我國蔬菜消費中占有重要地位?；ǖ漠a生代表著植物由營養生長轉變為生殖生長，不結球白菜以營養器官為產品，先期抽薹不僅降低生物產量，還影響其商品性和食用價值，給生產帶來巨大的損失。

因此，設計一種專用于不結球白菜早抽薹品種和材料的篩選、鑒定方法極為重要。

發明內容

本發明的目的在于提供一組不結球白菜早抽薹的分子標記引物，該組引物可用于不結球白菜早抽薹的篩選和鑒定，快速準確。

為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案：

一組不結球白菜早抽薹的分子標記引物，命名為pF7，其序列為：

pF7F：5’-CGATGGTACGGTGATGTCGT-3’（SEQ?ID?NO.1），

pF7R：5’-GGTGTTCCGGACCTTAGACA-3’（SEQ?ID?NO.2）。

上述分子標記引物在鑒定不結球白菜早抽薹品種或材料中的應用。

一種鑒定不結球白菜早抽薹品種或材料的方法，包括以下步驟：

步驟1，提取待鑒定品種或材料的基因組DNA；

步驟2，以步驟1提取的DNA為模板，利用上述分子標記引物pF7對其進行PCR擴增；

步驟3，以步驟2的PCR擴增產物進行電泳分離，獲得各樣品的帶型，如果得到517bp的片段，則說明待鑒定品種或材料為早抽薹。

進一步地，步驟2中，PCR擴增具體為：在20μL反應體系中，50ng/μL?DNA模板1μL、10μM?pF7引物各1μL、2×?Primer?Star?10μL、去離子水7μL；PCR擴增程序為：95℃預變性2min，98℃變性30s，56.5℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35個循環，4℃保存。

有益效果：

1.?本發明通過使用標記引物pF7，可快速、高效的鑒定不結球白菜早抽薹品種和材料。

2.?本發明輔助選擇方便，節約成本。不結球白菜抽薹開花時間品種的常規選育方法周期長，成本高，消耗大量的人力物力，通過本發明，可以實現苗期選擇，減少工作量，提高了選擇效率。

附圖說明

圖1為標記引物pF7在不同品種的不結球白菜PCR擴增后的瓊脂糖凝膠電泳結果圖，其中：M為DL2000?Marker，泳道1-6、8-23\24-29、31-33、39為早抽薹品種或材料，泳道7\30、34-38為晚抽薹品種或材料。

具體實施方式