[發(fā)明專(zhuān)利]蓋氏假單胞菌GT03、其應(yīng)用及所得防治劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110938896.8
• 申請(qǐng)日: 2021-08-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113493755B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓小斌;鄭艷芬;周亞男;王先勃;張成省;池興江;田維強(qiáng);丁繼林
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 貴州省煙草公司遵義市公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12Q1/689;C12Q1/04;A01N63/27;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/38
• 代理公司: 青島清泰聯(lián)信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37256
• 代理人: 張潔

本發(fā)明提出一種蓋氏假單胞菌(Pseudomonas gessardii)GT03、其應(yīng)用及所得防治劑，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。該蓋氏假單胞菌Pseudomonas gessardiiGT03，其特征在于，保藏編號(hào)為CGMCC No.22836，于2021年07月06日保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心。本發(fā)明提出的蓋氏假單胞菌具有良好的溶解有機(jī)磷的活性以及較強(qiáng)的產(chǎn)生長(zhǎng)素能力，在將該蓋氏假單胞菌用于煙草黑脛病的防治中時(shí)，可對(duì)煙草疫霉菌引起的黑脛病進(jìn)行有效抑制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種蓋氏假單胞菌(Pseudomonasgessardii)GT03、其應(yīng)用及所得防治劑。

背景技術(shù)

由煙草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)引起的黑脛病是最具破壞性的植物土傳病害之一。隨著生態(tài)農(nóng)業(yè)需求的增加，防治土傳病害不應(yīng)完全依賴(lài)于化學(xué)肥料和農(nóng)藥的使用。目前已有大量研究表明植物根際微生物可以作為生防菌和促生菌用來(lái)防治植物病害和促進(jìn)植物生長(zhǎng)。以其為原料制備的微生物制劑具有環(huán)境友好、無(wú)農(nóng)藥殘留的特點(diǎn)，為農(nóng)業(yè)綠色發(fā)展帶來(lái)積極作用，是提升植物產(chǎn)量和防控植物病害的有效途徑。

近年來(lái)，微生物菌劑已被應(yīng)用于煙草黑脛病的防治中，并且取得了一定的成效。但目前使用的微生物菌劑大多為芽孢桿菌，同質(zhì)化嚴(yán)重。事實(shí)上煙草根際存在著除芽孢桿菌外的許多種具有生防效果的細(xì)菌。因此，亟待尋找新的生防菌以豐富微生物菌劑的種類(lèi)。假單胞菌廣泛存在于植物根際中，多種假單胞菌被證實(shí)具有促生植物生長(zhǎng)、防治植物病害的效果，其促生作用主要表現(xiàn)在具有溶磷活性、ACC脫氨酶活性、產(chǎn)生長(zhǎng)素以及鐵載體的能力。然而，目前并未有研究報(bào)道過(guò)蓋氏假單胞菌(Pseudomonas gessardii)在防治煙草黑脛病上的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種蓋氏假單胞菌(Pseudomonas gessardii)GT03、其應(yīng)用及所得防治劑，通過(guò)對(duì)獲得的蓋氏假單胞菌進(jìn)行促生防病能力測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其具有良好的溶解有機(jī)磷的活性以及較強(qiáng)的產(chǎn)生長(zhǎng)素能力，在將該蓋氏假單胞菌用于煙草黑脛病的防治中時(shí)，可對(duì)煙草疫霉菌引起的黑脛病進(jìn)行有效抑制。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種蓋氏假單胞菌Pseudomonas gessardiiGT03，其特征在于，保藏編號(hào)為CGMCC No.22836，于2021年07月06日保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心。

作為優(yōu)選，所述蓋氏假單胞菌Pseudomonas gessardii GT03具有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列。

本發(fā)明提供了一種根據(jù)上述技術(shù)方案所述的蓋氏假單胞菌Pseudomonasgessardii GT03的PCR擴(kuò)增方法，包括以下步驟：

1)提取分離自土壤懸濁液中細(xì)菌菌株的基因組DNA；

2)以細(xì)菌菌株的基因組DNA為模板，使用上游引物和下游引物，采用rTaq酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

其中：PCR反應(yīng)體系為：2×Taq Master Mix 12.5μL、正反向引物(10μM)各1μL、DNA模板2μL、ddH₂O 8.5μL，總體系25μL。

作為優(yōu)選，擴(kuò)增條件為：95℃預(yù)變性5min；95℃變性1min、55℃退火1min、72℃延伸1.5min，循環(huán)30次；最后72℃延伸10min。

作為優(yōu)選，所述引物對(duì)為：

正向引物：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’；

反向引物：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’。

本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述技術(shù)方案所述的蓋氏假單胞菌Pseudomonasgessardii GT03在拮抗煙草疫霉Phytophthora nicotianae引起的黑脛病中的應(yīng)用。