[發(fā)明專利]負(fù)載噬菌體內(nèi)溶素的陽離子瓜爾膠脂質(zhì)體、其包被液及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110937847.2
• 申請(qǐng)日: 2021-08-16
• 公開（公告）號(hào): CN113750223A
• 公開（公告）日: 2021-12-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王靜雪;林洪;寧厚齊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K38/51
• 分類號(hào): A61K38/51;A61K9/127;A61K47/36;A61P31/04;C02F1/50;A01N25/10;A01N63/40;A01P1/00;C02F103/20
• 代理公司: 浙江永航聯(lián)科專利代理有限公司 33304
• 代理人: 侯蘭玉

1.一種脂質(zhì)體包被液，其特征是所述脂質(zhì)體包被液包括：

有效量的磷脂、膽固醇和彈性增強(qiáng)劑，

以及噬菌體內(nèi)溶素0.1-0.8 mg/mL，陽離子瓜爾膠；

包被液中，噬菌體內(nèi)溶素與陽離子瓜爾膠的重量比為1：1至1：15。

2.如權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包被液，其特征是：彈性增強(qiáng)劑選自膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、聚山梨醇酯80（Tween80）、脫水山梨糖醇單油酸酯（Span80）、油酸、甘草酸二鉀鹽（KG）和膽固醇醚中的一種或幾種。

3.如權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包被液，其特征是：所述噬菌體內(nèi)溶素為副溶血弧菌噬菌體內(nèi)溶素，噬菌體內(nèi)溶素與陽離子瓜爾膠的重量比為1：5至1：15。

4. 如權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包被液，其特征是：所述脂質(zhì)體包被液的10 mL體系含有：大豆卵磷脂 80 μg、膽固醇 20 μg、副溶血弧菌噬菌體內(nèi)溶素2-8 mg、陽離子瓜爾膠10-30 mg和Tween80 8-12 μL。

5.如權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包被液，其特征是該脂質(zhì)體包被液的制備方法包括以下步驟：

a) 將磷脂、膽固醇和彈性增強(qiáng)劑溶解在有機(jī)溶劑中形成預(yù)混物；

b) 從所述預(yù)混物中蒸發(fā)掉所述有機(jī)溶劑以形成磷脂膜；

c) 噬菌體內(nèi)溶素和陽離子瓜爾膠共混的體系與磷脂膜的水合；

d) 均化，以形成脂質(zhì)體的包被液。

6.如權(quán)利要求5所述的脂質(zhì)體包被液，其特征是該方法包括以下步驟：

S1、內(nèi)溶素的預(yù)處理：利用大腸桿菌表達(dá)重組噬菌體內(nèi)溶素，熱處理使其部分變性后，離心除去沉淀獲得內(nèi)溶素溶液；

S2、磷脂膜的制備：將磷脂、膽固醇、彈性增強(qiáng)劑溶解于有機(jī)溶劑的混合體系中得到預(yù)混物，將預(yù)混物旋蒸，在容器的內(nèi)壁上形成磷脂膜，干燥；

S3、磷脂膜的水合：向步驟S1制得的內(nèi)溶素溶液中加入陽離子瓜爾膠，使熱變性內(nèi)溶素與陽離子瓜爾膠的重量比為1：1至1：15，得到的混合液加入步驟S2所述的容器中，旋蒸，以使磷脂膜與容器壁分離，水化充分溶于混合液中；

S4、脂質(zhì)體包被液的制備：混合液經(jīng)水浴超聲處理后，得到脂質(zhì)體包被液。

7. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是：步驟S3中，混合液體系中，熱變性內(nèi)溶素濃度為200-400 μg/mL，所述的陽離子瓜爾膠添加濃度為1-3 mg /mL。

8.一種脂質(zhì)體，其特征是由權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包被液凍干后得到。

9.一種權(quán)利要求8所述的脂質(zhì)體或其包被液在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為殺菌劑的應(yīng)用。

10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征是：脂質(zhì)體添加至養(yǎng)殖水體中噬菌體內(nèi)溶素終濃度10至50 μg/mL。