[發(fā)明專利]一種合作豬源粘膜乳桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110927936.9
• 申請(qǐng)日: 2021-08-13
• 公開（公告）號(hào): CN113512516B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊巧麗;張生偉;裴利君;高小莉;王鵬飛;滾雙寶;馬艷萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);甘肅省農(nóng)民教育培訓(xùn)工作總站（甘肅省農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校）
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K35/747;A61P1/12;A61P31/04;C12R1/225
• 代理公司: 蘭州智和專利代理事務(wù)所(普通合伙) 62201
• 代理人: 張英荷

本發(fā)明公開了一種合作豬源粘膜乳桿菌及其應(yīng)用。該菌株命名為粘膜乳桿菌LM410，保藏號(hào)為CGMCC No.22828。該菌株分離自健康合作豬糞便，具有良好的產(chǎn)酸、耐酸和耐膽鹽能力以及拮抗病原菌能力。本發(fā)明提供的粘膜乳桿菌LM410能夠抑制C型產(chǎn)氣莢膜梭菌生長(zhǎng)并對(duì)C型產(chǎn)氣莢膜梭菌致豬腸上皮細(xì)胞損傷具有明顯保護(hù)作用，在畜禽細(xì)菌感染性腸道疾病防治方面具有廣闊的發(fā)展前景和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種合作豬源粘膜乳桿菌及其應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

仔豬腹瀉一直是困擾養(yǎng)豬生產(chǎn)的主要疾病之一，嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。據(jù)報(bào)道我國(guó)仔豬死亡率為15%～20%，其中由腹瀉引起的仔豬死亡數(shù)約占死亡總數(shù)的40%，每年給養(yǎng)豬業(yè)帶來的直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億元。C型產(chǎn)氣莢膜梭菌，又稱C型魏氏梭菌，是引起仔豬腹瀉的主要病原之一；其感染主要發(fā)生于2周齡以內(nèi)的仔豬，且具有發(fā)病急、病程短的特點(diǎn)，發(fā)病仔豬死亡率達(dá)70%以上，嚴(yán)重影響著養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。據(jù)報(bào)道，產(chǎn)氣莢膜梭菌感染性腹瀉在世界各養(yǎng)豬國(guó)家均有發(fā)生；經(jīng)調(diào)查2015年我國(guó)廣東、江西、湖北和云南的33個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)，產(chǎn)氣莢膜梭菌在仔豬哺乳階段的感染率高達(dá)80%。

盡管目前通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、注射疫苗和使用抗生素藥物防治等措施在一定程度上減少和控制了該腹瀉疾病的發(fā)生，但抗生素的長(zhǎng)期使用，出現(xiàn)了病原菌耐藥性增強(qiáng)和抗生素殘留等問題。與此同時(shí)，預(yù)防該病原感染的類毒素疫苗的效果易受其類毒素抗原成分的影響。這些問題使得對(duì)仔豬C型產(chǎn)氣莢膜梭菌感染性腹瀉防治的難度不斷加大，且無抗養(yǎng)殖和綠色健康養(yǎng)殖也要求盡可能減少甚至禁止抗生素的使用。因此，尋求一種替代抗生素的策略是防治仔豬C型產(chǎn)氣莢膜梭菌性腹瀉的迫切需求。

粘膜乳桿菌（Lactobacillus mucosae）是存在于動(dòng)物腸道中的乳酸桿菌類益生菌之一。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)，粘膜乳桿菌在細(xì)胞黏附、代謝碳水化合物產(chǎn)酸和拮抗致病菌等方面具有重要作用，其可通過緊密連接蛋白去磷酸化和肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)等影響腸屏障的完整性和功能。還有研究發(fā)現(xiàn)，粘膜乳桿菌在粘附于腸上皮組織形成生物被膜的同時(shí)產(chǎn)生抗菌素，具有抑制病原菌的定植并調(diào)節(jié)腸道免疫系統(tǒng)的益生作用。此外，Lactobacillus mucosaeNK41與長(zhǎng)雙歧桿菌（Bifidobacterium longum）協(xié)同作用，通過抑制核因子κB（Nuclear factor kappa-B，NF-κB）蛋白活化、腫瘤壞死因子-α（Tumor NecrosisFactor-α，TNF-α）表達(dá)以及細(xì)菌脂多糖的產(chǎn)生來減輕小鼠的結(jié)腸炎癥狀。說明開發(fā)利用粘膜乳桿菌作為防治畜禽細(xì)菌感染性腸道疾病的抗生素替代策略，具有廣闊的發(fā)展前景和應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種合作豬源粘膜乳桿菌，該粘膜乳桿菌具有良好的產(chǎn)酸、耐酸和耐膽鹽能力以及拮抗C型產(chǎn)氣莢膜梭菌生長(zhǎng)的能力。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供上述粘膜乳桿菌在防治C型產(chǎn)氣莢膜梭菌感染致豬腸上皮細(xì)胞IPEC-J2損傷中的應(yīng)用，在畜禽細(xì)菌感染性腸道疾病防治方面具有廣闊的發(fā)展前景和應(yīng)用價(jià)值。

為了解決上述問題，本發(fā)明首先提供了一種合作豬源粘膜乳桿菌，該粘膜乳桿菌是2021年7月6日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC）的粘膜乳桿菌Lactobacillus mucosae，保藏編號(hào)為CGMCC No.22828。保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。

所述粘膜乳桿菌Lactobacillus mucosae是從健康的合作豬糞便樣品中分離純化得到的。

所述粘膜乳桿菌Lactobacillus mucosae的16S rDNA序列為GenBank No.MZ047317。