[發明專利]用于遞送RNA的靶向外泌體

有效

• 申請號: 202110919023.2
• 申請日: 2021-08-11
• 公開（公告）號: CN113527519B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 尹樂;顧雨春
• 申請（專利權）人: 呈諾再生醫學科技（珠海橫琴新區）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/40;C12N15/867;C12N15/62;C12N5/10;A61K47/64;A61K47/65;A61K47/68;A61K31/7088;A61K48/00;A61P1/00;A61P1/04;A61P19/08;A61P29/0
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 李紅偉;孟祥斌

本發明公開了一種用于遞送RNA的靶向外泌體，所述外泌體的構建過程如下：將外泌體多肽在C端與識別特定RNA序列的RNA結合多肽融合，在N端與靶向目標細胞的靶向部分融合，構建表達表達載體表達上述融合蛋白，另外構建可以表達含有特定RNA序列的載體，將上述兩載體導入可以產生外泌體的細胞中。本發明的研究成果提供了一種遞送RNA的新思路。

發明領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及用于遞送RNA的靶向外泌體。

背景內容

外泌體(exosomes)是由細胞分泌的直徑為30～150nm的囊泡，細胞質膜凹陷形成的細胞內小泡，具有與細胞膜相同的膜結構，可以攜帶諸如RNA、蛋白質等大量成分，與細胞的生物學功能及細胞間的信號傳遞有著密切的關系。因其特殊的結構，相較人工合成的藥物載體，外泌體作為藥物載體進行藥物運輸有獨特的優勢，主要體現在外泌體的膜結構與細胞膜相同，可以提高藥物進入細胞的效率，甚至可以透過血腦屏障，同時外泌體引起的有害免疫反應極低，有很好的滲透滯留(EPR)效應從而具有緩釋效果等。目前已經嘗試用外泌體攜帶miRNA、siRNA、化學小分子藥物等進行基因治療和腫瘤治療等研究。但是如何將大分子mRNA遞送至外泌體從而產生攜帶mRNA的外泌體是本申請需要解決的問題。

發明內容

本申請涉及一種新型的RNA遞送方法，以外泌體作為運載工具遞送RNA。主要通過改造外泌體膜蛋白，將外泌體膜蛋白與識別特定RNA序列的蛋白融合，同時融合可以識別目標細胞膜蛋白的特定蛋白。使外泌體可以更容易被目標細胞胞吞。

根據本發明的一個方面，本發明提供了一種MS2蛋白識別序列，所述識別序列如SEQ ID NO.1所示。

根據本發明的另一個方面，本發明提供了一種包含前面所述的識別序列的RNA，所述RNA不是天然存在的RNA或其修飾。

本發明保護的包含識別序列的RNA是指那些天然并不存在識別序列但通過序列改造生成的包含識別序列的RNA。

本發明的所述RNA包括mRNA、miRNA、siRNA。

在本發明的具體實施例中，所述RNA是mRNA。

根據本發明的另一個方面，本發明提供了一種融合多肽，所述融合多肽包含RNA結合多肽以及細胞外囊泡多肽。

進一步，所述RNA結合多肽連接于細胞外囊泡多肽的C端。

進一步，細胞外囊泡是外泌體。