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[發(fā)明專利]一種用于鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的分子標記GLMI001引物對和應用在審

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 202110913110.7 申請日: 2021-08-10
公開(公告)號: CN113502348A 公開(公告)日: 2021-10-15
發(fā)明(設計)人: 李振皓;李明焱;熊暉;周莎莎;潘德宇;王曉彤;黃慶 申請(專利權)人: 浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司;金華壽仙谷藥業(yè)有限公司;浙江壽仙谷植物藥研究院有限公司
主分類號: C12Q1/6895 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 北京高沃律師事務所 11569 代理人: 劉奇
地址: 321200 浙江省*** 國省代碼: 浙江;33
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 用于 鑒定 系列 靈芝 菌種 分子 標記 glmi001 引物 應用
【權利要求書】:

1.一種用于鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的分子標記GLMI001引物對,其特征在于,所述引物對包括上游引物和下游引物;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根據(jù)權利要求1所述引物對,其特征在于,所述“仙芝系列”靈芝菌種包括仙芝1號、仙芝2號和仙芝3號。

3.一種鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中包括權利要求1或2所述引物對。

4.權利要求1或2所述引物對或權利要求3所述試劑盒在鑒定“仙芝系列”靈芝菌種中的應用。

5.一種快速鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的方法,其特征在于,包括以下步驟:以待測樣品的DNA為模板DNA,與權利要求1或2所述引物對或權利要求3所述試劑盒中的引物對混合后進行PCR擴增,PCR產(chǎn)物在600bp~700bp有3條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝1號;在600bp~700bp有1條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝2號;在600bp~700bp有2條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝3號。

6.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的反應程序包括:94℃預變性5min;94℃變性40s,56℃退火40s,72℃延伸90s,40個循環(huán);72℃延伸10min。

7.根據(jù)權利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的反應體系以20μL計,包括DNA模板2μL、上游引物1μL、下游引物1μL、2*Taq MasterMix 10μL和ddH2O 6μL。

8.根權利要求7所述的方法,其特征在于,所述上游引物和下游引物的濃度均為10μmol/L;所述DNA模板的濃度為50ng/μL。

9.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,所述待測樣品包括菌絲。

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