[發(fā)明專利]一種用于鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的分子標記GLMI001引物對和應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110913110.7 | 申請日: | 2021-08-10 |
| 公開(公告)號: | CN113502348A | 公開(公告)日: | 2021-10-15 |
| 發(fā)明(設計)人: | 李振皓;李明焱;熊暉;周莎莎;潘德宇;王曉彤;黃慶 | 申請(專利權)人: | 浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司;金華壽仙谷藥業(yè)有限公司;浙江壽仙谷植物藥研究院有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人: | 劉奇 |
| 地址: | 321200 浙江省*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 鑒定 系列 靈芝 菌種 分子 標記 glmi001 引物 應用 | ||
1.一種用于鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的分子標記GLMI001引物對,其特征在于,所述引物對包括上游引物和下游引物;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根據(jù)權利要求1所述引物對,其特征在于,所述“仙芝系列”靈芝菌種包括仙芝1號、仙芝2號和仙芝3號。
3.一種鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中包括權利要求1或2所述引物對。
4.權利要求1或2所述引物對或權利要求3所述試劑盒在鑒定“仙芝系列”靈芝菌種中的應用。
5.一種快速鑒定“仙芝系列”靈芝菌種的方法,其特征在于,包括以下步驟:以待測樣品的DNA為模板DNA,與權利要求1或2所述引物對或權利要求3所述試劑盒中的引物對混合后進行PCR擴增,PCR產(chǎn)物在600bp~700bp有3條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝1號;在600bp~700bp有1條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝2號;在600bp~700bp有2條DNA條帶,則表明待測樣品為仙芝3號。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的反應程序包括:94℃預變性5min;94℃變性40s,56℃退火40s,72℃延伸90s,40個循環(huán);72℃延伸10min。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的反應體系以20μL計,包括DNA模板2μL、上游引物1μL、下游引物1μL、2*Taq MasterMix 10μL和ddH2O 6μL。
8.根權利要求7所述的方法,其特征在于,所述上游引物和下游引物的濃度均為10μmol/L;所述DNA模板的濃度為50ng/μL。
9.根據(jù)權利要求5所述的方法,其特征在于,所述待測樣品包括菌絲。
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