[發明專利]一組同時檢測B/C/E組腺病毒的單克隆抗體和試紙條

有效

• 申請號: 202110910863.2
• 申請日: 2021-08-10
• 公開（公告）號: CN113354727B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 盧帥;張興林;李月;陳曼麗;張東暉;宋文俊
• 申請（專利權）人: 北京溯本源和生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C12N15/13;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/558
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 蘇士瑩

本發明提供一組同時檢測B/C/E組腺病毒的單克隆抗體和試紙條，涉及腺病毒檢測技術領域。本發明通過篩選獲得了針對目前流行的呼吸道腺病毒HAdV?B/C/E組特異的單克隆抗體，并利用其制備了一種檢測B/C/E組腺病毒的膠體金檢測試紙條，該試紙條具有很好的檢測效果，其中對ADV1/2/5/6的最低檢測限可達1.0×10³VP/ml；對ADV3/4/7的檢測限可達1.0×10⁴VP/ml；并驗證具有良好的特異性。本發明提供了一對單克隆抗體細胞株及一種同時檢測B/C/E組腺病毒的快速檢測方法，該檢測方法對呼吸道腺病毒的檢測效果好，操作簡便，可以作為腺病毒感染的臨床輔助診斷。

技術領域

本發明屬于腺病毒檢測技術領域，具體涉及一組同時檢測B/C/E組腺病毒的單克隆抗體和試紙條。

背景技術

腺病毒（Adenovirus）是一種無包膜的二十面體雙股DNA病毒，常侵犯呼吸系統、消化系統、泌尿系統、眼結膜等多器官。腺病毒在人群中常年流行，可發生于任何年齡組，全球多個國家和地區都曾發生過腺病毒感染的暴發，目前尚無特效的治療方法。腺病毒作為一種機會性病原，大約50%的感染無癥狀，但仍具有傳染性。

目前已發現的可感染人類的腺病毒約有69種血清型，可分為A-G的7個亞群。不同血清型腺病毒造成感染的組織嗜性有差異，其中B組、C組和E組常引起呼吸道感染，E組還可感染眼結膜，A組和F組主要感染胃腸道。腺病毒感染以呼吸道癥狀最為常見，其中B組的3/7型、C組的1/2/5/6型多引起兒童的急性呼吸道感染，E組的4型多與軍事訓練營地的急性呼吸道疾病疫情有關。腺病毒的抵抗力、感染性強，常引起聚集人群如家庭、幼兒園、小學等的暴發性流行，因此快速準確的診斷和處置，對控制和預防腺病毒感染及傳播十分必要。

病毒培養目前作為實驗室診斷的金標準，但受細胞培養周期的限制，難以在臨床中應用。熒光定量PCR與細胞培養法相比，靈敏度較高，但耗費昂貴，需專業人員操作，且大量樣本操作時易出現污染導致假陽性，因此現場應用受限。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一組產1H3和2A7單克隆抗體的雜交瘤細胞組、單克隆抗體及制備方法和應用，操作簡便、耗時短，能快速地檢測出呼吸道樣本中的腺病毒感染，檢測準確率高，非常適合呼吸道腺病毒感染的快速輔助診斷。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一組同時檢測B/C/E組腺病毒的單克隆抗體，所述單克隆抗體包括1H3和2A7，所述1H3的重鏈可變區包括三個互補決定區，所述互補決定區的氨基酸序列分別如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.3所示；所述1H3的輕鏈可變區包括三個互補決定區，所述互補決定區的氨基酸序列分別如SEQ ID NO.4~SEQ ID NO.6所示；

所述2A7的重鏈可變區包括三個互補決定區，所述互補決定區的氨基酸序列分別如SEQ ID NO.11~SEQ ID NO.13所示；所述2A7的輕鏈可變區包括三個互補決定區，所述互補決定區的氨基酸序列分別如SEQ ID NO.14~SEQ ID NO.16所示。

優選的，所述1H3的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述1H3的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

優選的，編碼所述1H3的重鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，編碼所述1H3的輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

優選的，所述2A7的重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述2A7的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。

優選的，編碼所述2A7的重鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，編碼所述2A7的輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示。