[發(fā)明專利]一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原、輸卵管癌靶標(biāo)抗原刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110909042.7
• 申請日: 2020-03-18
• 公開（公告）號: CN113388023A
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 焦順昌;張嶸;王海燕
• 申請（專利權(quán)）人: 北京鼎成肽源生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K14/74
• 分類號: C07K14/74;C12N5/0783;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 張夢澤

本發(fā)明提供了一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原、輸卵管癌靶標(biāo)抗原刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞及其應(yīng)用，屬于腫瘤治療技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明中所述輸卵管癌靶標(biāo)抗原的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示；本發(fā)明所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原是基于患者腫瘤組織的全外顯子檢測結(jié)果，通過預(yù)測分析、篩選獲得的有效的腫瘤抗原，利用所述輸卵管癌靶標(biāo)抗原培養(yǎng)獲得的CTL細(xì)胞，對腫瘤具有特異性的殺傷作用；本發(fā)明提供的輸卵管癌靶標(biāo)抗原可以應(yīng)用于輸卵管癌的治療。

本申請是申請日為2020年03月18日、申請?zhí)枮?02010190785.9、發(fā)明名稱為《一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合、輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞及其應(yīng)用》的分案申請。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于腫瘤治療技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合、輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性輸卵管癌是一種少見的女性生殖道惡性腫瘤。其發(fā)病率占婦科惡性腫瘤的0.5％。以40～65歲居多，多發(fā)生于絕經(jīng)后婦女。目前對于輸卵管癌的治療原則是以手術(shù)為主，輔助放療、化療的綜合治療。

隨著精準(zhǔn)治療的推廣，常規(guī)的化療、放療和靶向已無法滿足腫瘤的個性化和多變性，因此，尋找個性化的腫瘤新抗原，培養(yǎng)識別個性化腫瘤新抗原的CTL，將是徹底清除腫瘤的有效方法。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合、輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞及其應(yīng)用；本發(fā)明提供的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合是基于患者腫瘤組織的全外顯子檢測結(jié)果，通過預(yù)測分析、篩選獲得的有效的腫瘤抗原，利用所述輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合培養(yǎng)獲得的CTL細(xì)胞，對腫瘤具有特異性的殺傷作用；本發(fā)明提供的輸卵管癌靶標(biāo)抗原特異性針對同一種HLA類型的輸卵管癌，實現(xiàn)個性化治療。

本發(fā)明提供了一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合，包括氨基酸序列如SEQ ID No.7、SEQID No.8、SEQ ID No.9、SEQ ID No.16、SEQ ID No.23、SEQ ID No.31和SEQ ID No.45所示的抗原中的一種或幾種。

本發(fā)明提供了所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合在制備治療輸卵管癌的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合在制備治療輸卵管癌的CTL細(xì)胞中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種CTL細(xì)胞，所述CTL細(xì)胞為所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞。

本發(fā)明提供了所述的CTL細(xì)胞的制備方法，包括以下步驟：

1)將CTL細(xì)胞濃度調(diào)整至2～3×10⁵cells/mL；

2)將調(diào)整細(xì)胞濃度后的CTL細(xì)胞、IL-2和所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合混合獲得培養(yǎng)體系；

3)將所述培養(yǎng)體系進(jìn)行培養(yǎng)獲得輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合刺激培養(yǎng)的CTL細(xì)胞。

優(yōu)選的，IL-2在培養(yǎng)體系中的終濃度為150～250U/mL。

優(yōu)選的，所述的輸卵管癌靶標(biāo)抗原組合中每一種輸卵管癌靶標(biāo)抗原在培養(yǎng)體系中的終濃度為40～60ng/mL。

優(yōu)選的，步驟3)中所述培養(yǎng)的溫度為36～38℃，所述培養(yǎng)的時間為22～26h。

優(yōu)選的，步驟1)中所述的CTL細(xì)胞是通過PBMC細(xì)胞與APC細(xì)胞共培養(yǎng)獲得。

本發(fā)明提供了所述的CTL細(xì)胞在制備治療輸卵管癌藥物中的應(yīng)用。