[發明專利]一種基于PCR法的多種型別登革病毒引物組及應用該引物組的試劑盒

在審

• 申請號: 202110903631.4
• 申請日: 2021-08-06
• 公開（公告）號: CN113564281A
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 孫九峰;崔封夫;梁楚敏;曾麗連;劉哲;張歡;吳德
• 申請（專利權）人: 廣東省公共衛生研究院;廣東省疾病預防控制中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 肖宇揚

本發明提供了一種基于PCR法的多種型別登革病毒引物組，所述多種型別登革病毒引物組至少包括登革病毒I型引物組、登革病毒II型引物組、登革病毒III型引物組、登革病毒IV型引物組中的兩種或兩種以上；所述登革病毒I型引物組由第一引物組、第二引物組組成，所述登革病毒II型引物組由第三引物組、第四引物組組成，所述登革病毒III型引物組由第五引物組、第六引物組組成，所述登革病毒IV型引物組由第七引物組、第八引物組組成。本發明在試劑盒中采用登革病毒I型引物組、登革病毒II型引物組、登革病毒III型引物組、登革病毒IV型引物組中的兩種或兩種以上，使試劑盒具有快速、特異性及靈敏度高、成本相對低等優點。

技術領域

本發明涉及一種病毒檢測引物組，特別是涉及一種于PCR法的多種型別登革病毒引物組及應用該引物組的試劑盒。

背景技術

登革病毒(Dengue virus,DENV)屬黃病毒科(Flaviviridae)黃病毒屬(Flavivirus)，是有包膜的單股正鏈RNA病毒，其核酸結構由三種結構蛋白加一個脂蛋白包膜和七種非結構蛋白組成。登革病毒根據其抗原性不同可分為4種血清型(DENV I、II、III、IV)，能誘導機體產生異源性抗體。

登革熱(Dengue fever)是攜帶登革病毒的蚊媒埃及伊蚊(Aedesaegypti)或白紋伊蚊 (Aedesalbopictus)叮咬人體導致人出現發熱、皮疹、淋巴結腫大、肌肉關節痛和白細胞減少等癥狀的急性傳染病。臨床上將登革熱臨床癥狀由輕至重分為登革熱、登革出血熱和登革出血綜合征。后兩種重癥登革熱可致出血、器官損傷、休克甚至死亡。

登革熱人群普遍易感，目前尚未研發出有效疫苗，其廣泛流行于全球熱帶與亞熱帶的100 多個國家和地區。據世界衛生組織統計，每年全球約有25億人口遭受登革熱的健康威脅，約5100 萬人感染登革熱病毒，并造成近25000人死亡，登革熱已被世衛組織列為2019全球十大健康威脅之一。

我國南方屬亞熱帶地區，毗鄰東南亞登革熱疫區國家，白紋伊蚊分布廣泛，是登革熱疫情的高危爆發流行地區。1978-2017年間廣東地區總計報告登革熱病例72萬余例。廣東歷史上經歷過三次大規模暴發事件，第一次為1980年，報告病例45萬余例，第二次為1986年，報告病例近12萬例，第三次為2014年，報告病例超過4.5萬例。2013年以來，廣東省加強輸入病例監測及檢測后每月均有檢測到輸入病例，其輸入來源地主要為東南亞國家及非洲和南美洲地區的部分國家，而本地暴發病例也越來越頻繁，已經沒有早期蚊媒越冬的間歇期，提示廣東省登革熱的疫情形勢將愈發嚴峻。可見，登革熱已給廣東省的衛生經濟帶來不可忽視的巨大影響，并帶給當地人民嚴重的身心健康和生命安全威脅，已成為廣東當地重點防控的蟲媒傳染病，也是我國南方地區最嚴重的蟲媒傳染病。

登革熱疫情會在未來給我國造成更大的公共衛生威脅。因此，開發出一種針對四種型別登革熱的迅速、有效的新型實驗室檢測及可用于病毒溯源的試劑盒，對于疫情防控有重要的應用意義。不僅能準確迅速獲得流行株系基因組序列，對登革熱的應急檢測和研究病毒的分子變異的規律，實現更高效的登革熱預警防控有重要的應用意義，也有較高的產業價值。

發明內容

本發明提供了一種基于PCR法的多種型別登革病毒引物組及應用該引物組的試劑盒，以提高對登革病毒的特異性及靈敏度。

本發明提供了一種基于PCR法的多種型別登革病毒引物組，所述多種型別登革病毒引物組至少包括登革病毒I型引物組、登革病毒II型引物組、登革病毒III型引物組、登革病毒IV型引物組中的兩種或兩種以上；所述登革病毒I型引物組由第一引物組、第二引物組組成，所述登革病毒II型引物組由第三引物組、第四引物組組成，所述登革病毒III型引物組由第五引物組、第六引物組組成，所述登革病毒IV型引物組由第七引物組、第八引物組組成；