[發明專利]生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法

在審

• 申請號: 202110902006.8
• 申請日: 2021-08-06
• 公開（公告）號: CN113607851A
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: 欒玉靜;王芳琳;黃健;董穎;崔冠峰;接強;李少元;孫曉宇
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京冠榆知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11666
• 代理人: 朱亞琦

1.生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟A、生物檢材的處理：生物檢材經萃取處理后得到樣品提取液；

步驟B、標準物質溶液的準備：以水為溶劑，用13種貝類毒素的標準物質分別配制13種貝類毒素的標準物質溶液；

步驟C、標準溶液的準備：用13種貝類毒素的標準物質溶液分別配制13種貝類毒素的標準溶液；

步驟D、混合標準工作溶液的準備：分別用13種貝類毒素的標準物質溶液配制混合標準工作溶液；

步驟E、質控樣品的制備；

步驟F、分別吸取樣品提取液、空白樣品提取液、添加樣品提取液、標準溶液和混合標準工作溶液，采用液相色譜-質譜儀進行檢測，分析并計算檢測結果；

所述13中貝類毒素分別為：C1、C2、GTX1、GTX2、GTX3、GTX4、GTX5、STX、NEO、dcSTX、dcNEO、dcGTX2和dcGTX3。

2.根據權利要求1所述的生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法，其特征在于，在步驟A中，所述生物檢材為血液或尿液；

所述生物檢材的處理方法為：取血液或尿液的生物檢材樣品于離心管中，用乙酸溶液調節pH至2.0-4.0，離心后吸取上清液于容量瓶中；向含有沉淀物的離心管中再加入乙酸溶液，渦旋混合，再次離心，將兩次上清液合并，用乙酸溶液稀釋，得到樣品提取液。

3.根據權利要求2所述的生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法，其特征在于，在步驟A中，所述生物檢材為血液或尿液；

所述生物檢材的處理方法為：取血液或尿液的生物檢材樣品1.0mL于50mL離心管中，用1.0vt％乙酸溶液調節pH至2.0-4.0；4℃條件下7000r/min離心10min，然后吸取上清液于10mL容量瓶，向含有沉淀物的離心管中再加入3mL 1.0vt％乙酸溶液，渦旋混合，4℃條件下7000r/min再次離心10min，將兩次上清液合并，用1.0vt％乙酸稀釋至10.0mL，得到樣品提取液。

4.根據權利要求1所述的生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法，其特征在于，在步驟A中，所述生物檢材為生物組織；

所述生物檢材的處理方法為：取絞碎的生物組織于離心管中，加入乙酸溶液在冰水混合浴中進行組織勻漿，用乙酸溶液調節pH，渦旋混合，然后置于沸水浴中加熱；水浴加熱后取出離心管，再次渦旋混合，并冷卻至室溫，調節pH至2.0-4.0，離心后吸取上清液于容量瓶中；向含有沉淀物的離心管中加入乙酸溶液，渦旋混合，再次離心，將兩次上清液合并，用乙酸溶液稀釋，得到樣品提取液。

5.根據權利要求4所述的生物檢材中13種貝類毒素的檢驗方法，其特征在于，在步驟A中，所述生物檢材為生物組織；

所述生物檢材的處理方法為：稱取絞碎的組織1.0g，于50mL離心管中，加入5mL1.0vt％乙酸溶液在冰水混合浴中進行組織勻漿，用0.1vt％乙酸溶液調節2＜pH＜4，渦旋混合，然后置于沸水浴中加熱5min；水浴加熱后取出離心管，再次渦旋混合，并冷卻至室溫，調節pH至2.0-4.0；4℃條件下7000r/min離心10min，然后吸取上清液于10mL容量瓶，向含有沉淀物的離心管中再加入3mL 1.0vt％乙酸溶液，渦旋混合，4℃條件下7000r/min再次離心10min，將兩次上清液合并，用1.0vt％乙酸稀釋至10.0mL，得到樣品提取液。