[發明專利]西瓜融合基因、遺傳轉化方法及應用有效
| 申請號: | 202110897621.4 | 申請日: | 2021-08-05 |
| 公開(公告)號: | CN113528559B | 公開(公告)日: | 2023-05-30 |
| 發明(設計)人: | 韓志國;王偉平;張海雯;宋姣敏;潘文波;張華偉;章旺根 | 申請(專利權)人: | 北京大學現代農業研究院 |
| 主分類號: | C12N15/62 | 分類號: | C12N15/62;C12N15/82;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/34;C12R1/19;C12R1/01 |
| 代理公司: | 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240 | 代理人: | 路秀麗 |
| 地址: | 261000 山東省濰*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 西瓜 融合 基因 遺傳 轉化 方法 應用 | ||
1.一種西瓜融合基因,其特征在于,所述西瓜融合基因由ClGRF4基因和ClGIF1基因融合而成。
2.根據權利要求1所述的西瓜融合基因,其特征在于,所述ClGRF4基因的序列如SEQIDNO:1所示,所述ClGIF1基因的序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.根據權利要求2所述的西瓜融合基團,其特征在于,所述ClGRF4基因和所述ClGIF1基因經連接序列連接形成所述西瓜融合基因。
4.根據權利要求3所述的西瓜融合基團,其特征在于,所述連接序列為:GGCAGCGGCCGC。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的西瓜融合基團,其特征在于,所述西瓜融合基因的序列如SEQ?ID?NO:4所示。
6.權利要求1至5中任一項所述的西瓜融合基因編碼的融合蛋白。
7.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體包括西瓜生長調節基因及驅動所述西瓜生長調節基因表達的驅動元件,所述西瓜生長調節基因為權利要求1至5中任一項所述的西瓜融合基因。
8.根據權利要求7所述的重組載體,其特征在于,所述驅動元件包括啟動子序列和終止子序列。
9.根據權利要求8所述的重組載體,其特征在于,所述啟動子序列為雙子葉植物基因表達的啟動子。
10.根據權利要求9所述的重組載體,其特征在于,所述啟動子序列來源于擬南芥的UBQ10啟動子序列或花椰菜花葉病毒35s啟動子。
11.根據根據權利要求8所述的重組載體,其特征在于,所述終止子序列為適用于植物基因的終止子。
12.根據權利要求11所述的重組載體,其特征在于,所述終止子序列選自擬南芥的HspT終止子序列、Nos終止子或花椰菜花葉病毒35s的終止子。
13.根據權利要求7所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體還包括轉化目的基因。
14.根據權利要求13所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體進一步還包括所述轉化目的基因和/或所述西瓜融合基因的報告基因。
15.根據權利要求14所述的重組載體,其特征在于,所述報告基因包括抗性基因和/或編碼熒光蛋白的基因。
16.根據權利要求15所述的重組載體,其特征在于,所述抗性基因選自如下任意一種或多種:卡那霉素抗性基因、潮霉素抗性基因、壯觀霉素抗性基因及草銨膦抗性基因。
17.根據權利要求15所述的重組載體,其特征在于,所述編碼熒光蛋白的基因選自如下任意一種或多種:紅色熒光蛋白表達基因DsRed2、綠色熒光蛋白表達基因GFP、紅色熒光蛋白表達基因mCherry及黃色熒光蛋白表達基因YFP。
18.根據權利要求7所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體選自如下任意一種:pKSE401、pBSE401、pHSE401及pAS083。
19.一種非植物的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞轉化有權利要求7至18中任一項所述的重組載體。
20.根據權利要求19所述的宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞選自大腸桿菌菌株DH5α、農桿菌菌株EHA105、LBA4404、AGL1或GV3101。
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