[發明專利]一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法

在審

• 申請號: 202110896231.5
• 申請日: 2021-08-05
• 公開（公告）號: CN113624959A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 李倩;張西亞;丁明月;毛燁炫;方東來
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 北京專贏專利代理有限公司 11797
• 代理人: 陳進

1.一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

制備膠體金：采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金；金標抗體的pH調節；金標抗體的pH的進一步優化；抗原優化；抗原加標優化確定試紙條。

2.如權利要求1所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述制備膠體金的操作步驟如下：

先用雙蒸餾水將1%的氯金酸稀釋100倍，再取100mL稀釋液用恒溫電磁攪拌器將溶液加熱至沸騰，在持續攪拌下迅速加入2.5mL的1%檸檬酸三鈉溶液，當溶液顏色呈現出均勻的酒紅色時停止攪拌加熱，冷卻至20℃后再用雙蒸餾水將溶液定容至100mL，將制備好的膠體金溶液放于4℃、避光的條件下保存。

3.如權利要求2所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述金標抗體的pH調節的操作步驟為：先將抗體溶液稀釋100倍備用；向膠體金溶液中加入0μL、5μL、10μL、15μL、20μL、25μL、30μL的0.1moL/L的K₂CO₃溶液，充分混勻后靜置，再加入所述稀釋后的抗體溶液，進行混勻，靜置，采用BSA溶液選擇金標抗體1。

4.如權利要求3所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述采用BSA溶液選擇金標抗體溶液的操作步驟為：靜置完成后再加入20μL的BSA溶液對其進行封閉，觀察溶液的顏色，使溶液顏色保持不變的K₂CO₃用量為最佳用量，選取顏色接近的K₂CO₃的金標抗體1。

5.如權利要求4所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述金標抗體的pH的進一步優化的操作步驟為：選取顏色接近的K₂CO₃的金標抗體溶液，在抗原稀釋10倍、二抗稀釋3倍的條件下，制做試紙條1，向制做出的兩種試紙條1中分別加入2μL、4μL、6μL的金標抗體，添加完成后靜置6min，根據其顯色結果，選取顯色深的金標抗體2。

6.如權利要求5所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述抗原優化的操作步驟為：在抗原稀釋10倍，二抗稀釋3倍的條件和抗原稀釋5倍，二抗稀釋3倍的條件下，制備出兩種試紙條2，向試紙條2分別加入2μL、4μL、6μL的抗原，靜置6min后，察看試紙條顯色情況，確定優化抗原。

7.如權利要求6所述的一種可快速檢測林可霉素的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述抗原加標優化確定試紙條的操作步驟為：將所述優化抗原稀釋10倍和抗原稀釋5倍，添加所述金標抗體2條件下，制備出兩種試紙條3，檢測0ng/mL、2ng/mL、10ng/mL的林可霉素標準品，觀察顯色結果，確定試紙條產品。