[發明專利]一種新型單細胞western blot的微流控芯片

在審

• 申請號: 202110895748.2
• 申請日: 2021-08-05
• 公開（公告）號: CN113617403A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 丁顯廷;謝海洋;丁屹;李山鶴;朱大為
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;G01N27/447;G01N33/53
• 代理公司: 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

1.一種新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片包括：邊梁、整流柱、導流三角、細胞捕獲欄、基板；所述微流控芯片基于單縫微阱單細胞捕獲結構，所述微流控芯片包括可分離的滑動芯片結構，所述微流控芯片的主體為開放式結構。

2.如權利要求1所述的新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述基板為透明玻璃。

3.如權利要求1所述的新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述邊梁、所述整流柱、所述導流三角、所述細胞捕獲欄由4％SDS-PAGE膠制成。

4.如權利要求1所述的新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述細胞捕獲欄的樣式包括：單縫欄、U型欄和雙縫欄。

5.如權利要求1所述的新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片的上方覆蓋一層透明玻璃，形成閉合微流控通道。

6.如權利要求1所述的新型單細胞western blot的微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片能夠同時非選擇性捕獲細胞，包括不同細胞周期的細胞和不同細胞活性的細胞。

7.一種如權利要求1至6任一所述的新型單細胞western blot的微流控芯片的工作流程，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、將細胞懸液充分震蕩后，從芯片上方注入，細胞被單縫微捕獲；

步驟2、將電泳膠凝從芯片上方注入，替換掉所有的細胞懸液中液體；

步驟3、通過紫外或加熱方式將凝膠固化；

步驟4、移除透明玻璃，放入電泳槽分離蛋白。

8.如權利要求7所述的新型單細胞western blot的微流控芯片的工作流程，其特征在于，所述步驟1還包括：

步驟1.1、用注射器或移液槍抽取并滴加足量PBS溶液到芯片表面，使得芯片表面全部浸潤在PBS溶液中；

步驟1.2、將與所述基板相同大小的覆蓋玻璃覆蓋在芯片上并排出所有氣泡，使用固定架將所述基板與所述覆蓋玻璃夾緊，確保所述覆蓋玻璃緊貼芯片兩側的所述邊梁；

步驟1.3、在固定了30度斜坡的培養皿中加入適量的PBS溶液，將芯片放置在30度的斜坡上，且下端連通斜坡下的PBS溶液；

步驟1.4、將經過預處理的細胞樣本通過注射器或移液槍滴加在芯片上端所述基板與所述覆蓋玻璃之間，在表面張力的作用下細胞樣本會進入芯片；

步驟1.5、細胞在從芯片上端流向細胞下端的過程中，所述細胞捕獲欄將捕獲單個的細胞。

9.如權利要求8所述的新型單細胞western blot的微流控芯片的工作流程，其特征在于，所述步驟2還包括：

步驟2.1、將PBS溶液通過注射器或移液槍滴加在芯片上端所述基板與所述覆蓋玻璃之間，沖洗掉芯片內過量的未被捕獲欄捕獲的細胞；

步驟2.2、將濃度為8％或10％的SDS-PAGE膠通過注射器或移液槍滴加在芯片上端所述基板與所述覆蓋玻璃之間，通過表面張力替換掉全部的PBS溶液。

10.如權利要求9所述的新型單細胞western blot的微流控芯片的工作流程，其特征在于，所述步驟4具體為：待所述步驟2.2加入的SDS-PAGE膠凝固后，移除所述覆蓋玻璃，即可進行常規的單細胞電泳和免疫印跡測量。