[發明專利]一種用于培養腫瘤細胞的方法

有效

• 申請號: 202110888798.8
• 申請日: 2021-08-04
• 公開（公告）號: CN113564125B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 李燕;彭亮;朱兆承;付檳梵;焦玥;曹小琴
• 申請（專利權）人: 河南省腫瘤醫院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12M3/00;C12M1/04;G06T7/00;G06T7/11;G06T5/00
• 代理公司: 成都其高專利代理事務所(特殊普通合伙) 51244
• 代理人: 任坤

1.一種用于培養腫瘤細胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：S1，將取得的腫瘤組織去除脂肪、結締組織，清洗并剪碎組織，通過進料口接種在裝有完全培養液的培養室內；

S2，通過系統設置的溶氧度測量模塊、溫度測量模塊測量培養室內腫瘤細胞培養的外在環境，并通過工控機的MCU對數據進行分析處理；

S3，細胞培養的過程中，根據溶氧傳感器的測量數據，通過工控機控制電機驅動曲軸，帶動供氧機構運轉，對培養室內供給新鮮空氣，對培養室內的空氣環境進行置換，改善培養環境；

S4，通過相差顯微鏡獲取腫瘤細胞的圖像，通過細胞圖像分析子模塊對獲取細胞圖像進行分析處理，便于觀察細胞培養過程中的生長情況，及時做相應調整，提高培養質量；

步驟S2中，溫度測量模塊的數據采集卡通過溫度傳感器進行溫度采集時，處理步驟包括，a，培養室設置的采樣頻率為1Hz，且每隔1毫秒工控機的MCU通過數據采集卡的AD芯片連續讀取100個有效溫度值；b，去掉采集有效溫度值中的最大值和最小值，取剩下數據的平均值，并且存儲到對應的數組P里；c，采用五階小波分解數組P，得到對應的細節小波系數序列p1，p2，p3，p4，p5，在對每個細節小波系數序列進行給定閾值的濾波處理，得到p11，p22，p33，p44，p55；d，對步驟c中得到的新數據組進行小波反變換，濾波完成得到干凈的溫度信號；

步驟S3中，當溶氧傳感器檢測到培養室內的溶氧量低小于正常時值的時候，工控機控制打開電機，電機帶動曲軸轉動，曲軸在轉動的過程中，當第一筒體內的曲軸帶動第一連桿和第一推桿向上運行時，由于進氣口的第一氣門受到負壓的作用，呈開啟狀態，空氣進入第一筒體內，且第一進氣管處設置的第三進氣門呈受到負壓作用成閉合狀態；第三筒體與第一筒體狀態相同；同時第二筒體內的第二連桿和第二推桿受到曲軸的作用向下運動，此過程中，由于第三氣門受到負壓作用呈閉合狀態，第二筒體底部的導氣管處設置的第二氣門受到壓力作用呈開啟狀態，第二筒體內的空氣受到壓力作用快速進入到導氣管中，從導氣管進入到分流板，經分流板的出氣孔均勻的輸入到培養室內；

步驟S4中，所述細胞圖像分析子模塊包括細胞圖像獲取、細胞圖像處理、測量對比、得出細胞質量結果，首先通過相差顯微鏡獲取細胞圖像，并且對圖向進行預處理，降低圖像中的噪聲污染，之后將數據分段，設定感興趣區域，進行數據提取，增加圖像精致度；其次將獲取的圖像分為多個層級結構信息，并且基于細胞主要信息提出幀間關聯方法，用于檢測和跟蹤細胞，對圖像進行分割處理；最后將上述圖像處理結果的幾何參數與細胞圖像的標準值進行對比，得出培養細胞質量結果；

步驟S4中，所述細胞圖像分析子模塊對于細胞圖像處理的過程中，根據細胞圖片像素信息將數據特征信號分層，對每一層的數據均采用聚類算法找出每一層數據的類中心，得出新的數據集合，對于新的數據通過模糊均值算法確定最佳分類中心和聚類中心，采用此方法直到新的聚類中心與上次得到的聚類中心距離在允許誤差范圍內，最后得出圖像多層級結構的信息抽取，多層級結構的信息抽取包括主要信息、中間信息、次要信息，同時對序列第一幀制作針對主要信息的目標初始化結果。