[發明專利]一種生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202110886431.2
• 申請日: 2021-08-03
• 公開（公告）號: CN113588967A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 劉健;王德健;沈林;陳汝彬;孫長貴;聶勇;黃博文;雷錚宇;孔佳能;趙彥
• 申請（專利權）人: 湖南永和陽光生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/532
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 張夢澤

本發明提供了一種生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光檢測試劑盒，屬于試劑盒技術領域。本發明提供的試劑盒，包括磁微粒試劑和吖啶酯試劑；所述磁微粒試劑包括磁珠包被的ST2抗體1；所述ST2抗體1購自北京霍爾姆斯生物技術有限公司，產品編號為HM148A?1148E；所述吖啶酯試劑包括吖啶酯標記的ST2抗體2；所述ST2抗體2購自北京霍爾姆斯生物技術有限公司，產品編號為HM148A?1148F；所述磁珠的粒徑為1～3μm，所述磁珠的表面帶有羧基活性基團。本發明提供的生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光免疫檢測試劑盒不僅靈敏度高、特異性好、精密度高、反應時間短，而且操作簡單，無需添加催化劑。

技術領域

本發明屬于試劑盒技術領域，具體涉及一種生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光檢測試劑盒。

背景技術

生長刺激表達基因2蛋白(ST2)是白介素受體家族的成員，由328個氨基酸組成，具有3個免疫球蛋白結構域及9個糖基化位點，可以由心肌細胞在心肌應激時表達。2013年美國ACC/AHA/HFSA心衰指南指出，ST2為心肌纖維化的標志物，可以預測心衰患者的入院和死亡概率。2017年ST2被納入《中國急性心力衰竭急診臨床實踐指南》。2020年ST2被納入《2020心力衰竭生物標志物中國專家共識》。目前，臨床或實驗室對于ST2檢測的方法有酶聯免疫法、熒光免疫層析法和酶促化學發光法。酶聯免疫法檢測時間長，重復性差；熒光免疫層析法靈敏度低，容易出現漏檢現象；酶促化學發光法干擾因素較多，且需要催化劑。因此，目前迫切需要一種靈敏度高、特異性好的快速檢測ST2的方法。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光檢測試劑盒。本發明提供的生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光檢測試劑盒具有靈敏度高、特異性好、精密度高、反應時間短、操作簡單的優勢。

為了實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

本發明提供了一種生長刺激表達基因2蛋白的磁微粒化學發光免疫檢測試劑盒，包括磁微粒試劑和吖啶酯試劑；所述磁微粒試劑包括磁珠包被的生長刺激表達基因2蛋白抗體1；所述生長刺激表達基因2蛋白抗體1購自北京霍爾姆斯生物技術有限公司，產品編號為HM148A-1148E；所述吖啶酯試劑包括吖啶酯標記的生長刺激表達基因2蛋白抗體2；所述生長刺激表達基因2蛋白抗體2 購自北京霍爾姆斯生物技術有限公司，產品編號為HM148A-1148F；所述磁珠的粒徑為1～3μm，所述磁珠的表面帶有羧基活性基團。

優選的，所述磁微粒試劑中磁珠包被的生長刺激表達基因2蛋白抗體1的濃度為2～8μg/mL；所述吖啶酯試劑中吖啶酯標記的生長刺激表達基因2蛋白抗體2的濃度為5～10μg/mL。

優選的，所述磁微粒試劑中還包括如下濃度的組分：PBS緩沖液0.01M、新生牛血清200～300mL/L、Proclin3000.1～1mL/L、甘油200～300mL/L、吐溫 200.1～1mL/L和BSA 1～10g/L。

優選的，所述吖啶酯試劑中還包括如下濃度的組分：PBS緩沖液0.01M、甘油100～400mL/L和BSA 5～50g/L。

優選的，所述磁珠包被的生長刺激表達基因2蛋白抗體1的制備方法為：將磁珠用磁珠清洗液清洗后重懸，使磁珠的濃度為5～100mg/mL；在磁珠重懸液中加入EDC和NHS對磁珠進行活化；將活化后的磁珠用磁珠清洗液進行清洗并重懸，使活化后的磁珠的濃度為5～100mg/mL；將生長刺激表達基因2蛋白抗體1加入重懸并活化后的磁珠中進行交聯，交聯后用磁珠封閉液進行封閉，得到磁珠包被的生長刺激表達基因2蛋白抗體1；

所述活化步驟中，EDC在活化體系中的終濃度為0.5～50mg/mL，NHS在活化體系中的終濃度為0.5～50mg/mL；所述活化的溫度為18～30℃；所述活化的時間為10～60min；所述活化的轉速為100～1000rpm；