[發明專利]一種具有抑制念珠菌生長繁殖作用的訂書肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110879920.5
• 申請日: 2021-08-02
• 公開（公告）號: CN113651874B
• 公開（公告）日: 2023-02-10
• 發明（設計）人: 陳思
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/10;A61P31/10
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 李陽

本發明涉及多肽藥物領域，具體是一種具有抑制念珠菌生長繁殖作用的訂書肽及其制備方法和應用。本發明以氨基樹脂為載體，按照直連肽模板Aurein1.2：Ac?GLFDIIKKIAESF?NH₂氨基酸序列在DIC?Oxime縮合體系中，通過Fmoc固相合成法，合成得到肽鏈，并且在保留關鍵氨基酸殘基的基礎上，在特定位置用S₅代替原有的氨基酸，連接在樹脂上直鏈肽在GrubbsⅠ試劑的二氯乙烷溶液中進行烯烴復分解反應環合后，從樹脂上切下得到目標訂書肽。本發明的方法簡單易行，純度高，產率高。進一步的實驗證實，本發明的訂書肽可以顯著抑制真菌的生長、繁殖，在治療念珠菌感染疾病方面具有潛在的應用價值。

技術領域

本發明涉及多肽藥物領域，具體地說，是一種具有抑制念珠菌生長繁殖作用的訂書肽及其制備方法和應用。

背景技術

近年來,隨著化療、糖皮質激素及免疫抑制劑的廣泛應用,機會性真菌感染的發生率不斷增加,念珠菌是臨床上引起機會性真菌感染最常見的病原菌。菌種通過侵犯宿主的粘膜和組織致病，引發局部及全身的炎癥反應,嚴重威脅人類生命與健康。常見的念珠菌血癥就是由念珠菌引起的血液感染,稱為臨床第四大血流感染疾病，具有相當高的死亡率，發病率也逐年上升，目前臨床上可用的抗真菌藥物種類有限，抗菌譜窄、耐藥性高，毒副作用明顯，念珠菌血癥難以很好的控制，為臨床治療帶來了嚴峻挑戰。設計、合成具有抑制念珠菌生長、繁殖的多肽藥物，有助于為診斷、預防和治療念珠菌病提供新的理論策略。真菌病對人類的生命健康具有重要影響，目前臨床常見的抗真菌藥物也存在一定的缺陷，比如氟胞嘧啶因其極易引起繼發性耐藥而通常與其他抗真菌藥聯用，較少單獨使用。兩性霉素B，主要用于治療深部真菌感染，其抗菌作用強，但毒副作用大，限制了其臨床應用。

本申請發明人在現有技術披露的眾多信息中注意到，有文獻報道Aurein1.2直連肽具有一定的抑菌作用，而在直連肽的基礎上適當優化可得到活性更好，穩定性更高的多肽藥物(Li,X.,et al.,Stapled Helical Peptides Bearing Different AnchoringResidues.Chem Rev,2020.120(18):p.10079-10144)。因此，本申請發明人推測將Aurein1.2進行修飾，設計合成一系列的訂書肽，從而達到提高Aurein1.2抑菌活性的目的。

生物體內蛋白質之間的相互作用在生命過程中起著至關重要的作用。通過人工合成分子來調控蛋白-蛋白相互作用界面是一種有效的策略，其已經廣泛地應用于藥物化學中以進行疾病干預，其中人工合成多肽即為調控蛋白間相互作用的一種重要手段。但因存在穩定性低，透膜性差等問題，當前，多肽類藥物在臨床上的應用受到了較大的限制。應用全碳骨架形成側鏈環合結構改造多肽來穩定α-螺旋肽的活性構象，即訂書肽(stapledpeptide)，成為克服這一缺陷的最直接最有效方法。有文獻報道出Aurein1.2的抗菌活性及可能的機制研究，但未見對其訂書肽的相關研究。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種具有抑制念珠菌生長繁殖作用的訂書肽及其制備方法和應用。

本發明的第一方面，提供一種訂書肽，是以直連肽Aurein1.2：Ac-GLFDIIKKIAESF-NH₂(SEQ ID NO.1)為肽鏈模板，氨基酸序列設計并合成9條訂書肽。

所述的訂書肽選自下列中的一種：

a)以Ac-GLFDIIKKIAESF-NH₂為肽鏈模板，其中1_G和5_I被S₅替換并環合；

b)以Ac-GLFDIIKKIAESF-NH₂為肽鏈模板，其中2_L和6_I被S₅替換并環合；