[發(fā)明專利]一種糖化血紅蛋白用強陽離子交換色譜填料的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110869830.8
• 申請日: 2021-07-30
• 公開（公告）號: CN113663742A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮巧芳;李俊;彭偉;鄒麗潔;林滔;劉巖
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫市凱奧善生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: B01J39/18
• 分類號: B01J39/18;B01J39/19;B01J39/20;C08F220/14;C08F222/14;C08F220/58
• 代理公司: 無錫市才標(biāo)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32323
• 代理人: 張迎召

本發(fā)明提供了一種糖化血紅蛋白用強陽離子交換色譜填料的制備方法，包括包括如下步驟：步驟一；對第一單體初步聚合，形成粒徑單分散的微球；步驟二；對第一單體進一步交聯(lián)聚合，擴大微球的粒徑；步驟三；進一步地引入第二單體進行聚合，將功能官能團聚合在微球上；步驟四；清洗，將反應(yīng)體系中的溶劑、分散劑以及多余的單體等除去。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，設(shè)計合理，結(jié)構(gòu)緊湊，本發(fā)明通過多步分散聚合法，獲得2?15μm的粒徑單分散的強陽離子交換色譜填料。可以避免現(xiàn)有填料合成方法的合成過程中的分級處理或種子溶脹，以及微球后修飾等繁雜操作，制備方法更加簡單可控。采用多步分散聚合法獲得的強陽離子交換色譜填料，能夠?qū)崿F(xiàn)對于糖化血紅蛋白的分離檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及糖化血紅蛋白色譜填料制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種糖化血紅蛋白用強陽離子交換色譜填料的制備方法。

背景技術(shù)

糖化血紅蛋白(GHb)是紅細胞中的血紅蛋白與血清中的糖類相結(jié)合的產(chǎn)物。它是通過緩慢、持續(xù)及不可逆的糖化反應(yīng)形成，其含量的多少取決于血糖濃度以及血糖與血紅蛋白接觸時間，而與抽血時間、患者是否空腹、是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)。GHb由HbA1a、HbA1b、HbA1c組成，其中HbA1c約占70％，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，目前HbA1c是評價糖尿病患者長期血糖控制狀況的“金標(biāo)準(zhǔn)”，在糖尿病治療及其并發(fā)癥監(jiān)測中具有重要價值。

高效液相糖化血紅蛋白檢測系統(tǒng)實現(xiàn)的是對HbA1c的定量檢測。根據(jù)高效液相色譜法(HPLC)的工作原理，在離子交換法對糖化血紅蛋白的檢測分析中，高效液相分析儀、洗脫試劑、層析柱、校準(zhǔn)品等對檢測結(jié)果都會產(chǎn)生影響，而其中層析柱對于糖化血紅蛋白的分離能力起著非常重要的作用。

目前，合成高聚物填料的方法有很多種，包括懸浮聚合法、種子聚合法、分散聚合法等。懸浮聚合法合成的微球粒度分布范圍很寬，必須經(jīng)過分級處理才能用作色譜填料。

種子聚合法需預(yù)先制備小粒徑聚合物顆粒，以各種單體、引發(fā)劑等小分子化合物溶脹長大后再在高溫下引發(fā)聚合，制備過程比較復(fù)雜。

為此，我們提出一種糖化血紅蛋白用強陽離子交換色譜填料的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于解決或者至少緩解現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題。

為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：

一種糖化血紅蛋白用強陽離子交換色譜填料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一；對第一單體初步聚合；稱取10-15份的第一單體、2-5份的引發(fā)劑和5-10份的穩(wěn)定劑加入70-83份的介質(zhì)中混合均勻，均勻溶解后在60-75℃水浴加熱的情況下攪拌反應(yīng)2-3h；

步驟二；對第一單體進一步交聯(lián)聚合，擴大微球的粒徑；稱取2-10份的第一單體、1-5份的交聯(lián)劑、2-5份的引發(fā)劑和5-10份的穩(wěn)定劑，溶解均勻后加入反應(yīng)后的步驟一的聚合體系中繼續(xù)水浴加熱攪拌反應(yīng)2-3h；

步驟三；進一步地引入第二單體進行聚合，將功能官能團聚合在微球上；稱取2-10份的第二單體和1-5份的引發(fā)劑，溶解均勻后加入步驟二的反應(yīng)體系中繼續(xù)水浴加熱攪拌反應(yīng)12-16h；

步驟四；清洗。對步驟三完成的反應(yīng)液進行離心處理，對沉淀的聚合微球用乙醇和純化水重復(fù)離心和清洗工序1-3次后，干燥得到最終的單分散的強陽離子交換色譜填料。

可選地，在所述步驟一中還需要進行除氧操作，通過通入氮氣10min以除去裝置中的氧氣。

可選地，所述第一單體為甲基丙烯酸甲酯、苯乙烯、甲基丙烯酸縮水甘油酯中的一種或幾種以任意組合使用。

可選地，所述介質(zhì)為乙醇、甲醇、甲苯、純化水中的一種或幾種任意組合使用。

可選地，所述步驟二的步驟一的聚合體系需要經(jīng)過3h的反應(yīng)。