[發明專利]光倒刺鲃的雄性分子標記及其應用

有效

• 申請號: 202110867783.3
• 申請日: 2021-07-29
• 公開（公告）號: CN113462787B
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發明（設計）人: 李強;李文俊;韓崇;李隴旭;易祖盛;桂林;鐘良明;陳杰湖;黃靖傳
• 申請（專利權）人: 廣州大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/11;A01K61/10;A01K67/027
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 林德強

本發明公開了光倒刺鲃的雄性分子標記及其應用，所述雄性分子標記的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，本發明還提供了特異性擴增分子標記的引物。本發明從光倒刺鲃中篩選獲得了雄性特異性的分子標記，根據該分子標記設計的檢測引物只能在光倒刺鲃雄性個體中擴增出目的條帶，從而可以用該分子標記鑒定或輔助鑒定光倒刺鲃的性別。同時還提供了一種光倒刺鲃性別鑒別的方法。通過該技術可以快速、準確、便捷地鑒定光倒刺鲃的性別，特異性為100％，且對魚體傷害較低，為光倒刺鲃性控育種和種質資源保護、改進與可持續利用提供幫助。

技術領域

本發明屬于分子生物技術領域，具體涉及光倒刺鲃的雄性分子標記及其應用。

背景技術

光倒刺鲃(Spinibarbus?hollandi)，隸屬于鯉形目，鯉科，鲃亞科，倒刺鲃屬。主要分布于中國的長江以南各個水系，是一種具有較高營養和藥用價值的名優經濟魚類，深受市場和養殖戶喜愛。然而，自20世紀80年代以來，由于各種人為因素導致光倒刺鲃的自然種群資源急劇下降，在我國許多江河已難覓蹤跡。為保護這一水產種質資源，農業部先后在廣東、廣西、江西、福建、湖南、安徽等省建立了10多個光倒刺鲃國家級水產種質資源保護區。

光倒刺鲃的生長呈現性別二態性，在成魚養殖階段，雌魚生長比雄魚快。因此，探索光倒刺鲃性別分化的調控機制，建立全雌或高比例雌性光倒刺鲃培育新技術對其種質資源保護和開發利用具有重要的理論和實際意義。而性別特異分子標記的開發有助于準確快速獲取表型，判斷性別，從而開展人工繁殖和選育等工作，也有助于在商業生產中開展性別控制育種技術研究，進而建立單性體系。如今，尚無能夠成功鑒定光倒刺鲃遺傳性別的分子標記的報道，因此，開發一種準確鑒定遺傳雄性的分子標記在光倒刺鲃人工繁育中具有極大的生產應用價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種可以準確鑒定雄性光倒刺鲃的分子標記。

本發明所采取的技術方案是：

本發明的第一個方面，提供一種光倒刺鲃的雄性分子標記，所述分子標記的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

本發明的第二個方面，提供一種引物，擴增本發明第一方面所述的分子標記。

在本發明的一些實施方式中，所述引物為：

P20-F：5’-TGCAAACTGTCTGGCATTCTC-3’(SEQ?ID?NO.2)；

P20-R：5’-ATCTACTGCCCTCTGTCCTTT-3’(SEQ?ID?NO.3)。

本發明的第三方面，提供一種試劑盒，所述試劑盒包含本發明第二方面所述的引物。

本發明的第四方面，提供本發明第一方面所述分子標記或本發明第二方面所述引物或本發明第三方面所述試劑盒在用于鑒定或輔助鑒定雄性光倒刺鲃遺傳性別中的應用。采用本發明第二個方面所述引物或本發明第三個方面所述試劑盒對光倒刺鲃進行檢測，篩選出雄性光倒刺鲃的品種，有利于鑒定或輔助鑒定雄性光倒刺鲃遺傳性別。

本發明的第五方面，提供本發明第一方面所述分子標記或本發明第二方面所述引物或本發明第三方面所述試劑盒在光倒刺鲃遺傳育種中的應用。

本發明的第六方面，提供本發明第一方面所述分子標記或本發明第二方面所述引物或本發明第三方面所述試劑盒在光倒刺鲃種質資源改進中的應用。

本發明的第七方面，提供一種用于篩選雄性光倒刺鲃的方法，通過檢測本發明第一方面所述分子標記，選擇含有分子標記的個體。

在本發明的一些實施方式中，所述方法包括如下步驟：

(1)提取待檢樣品基因組DNA；

(2)以提取得到的DNA為模板，利用本發明第二方面所述的引物進行PCR擴增，得到PCR產物；