[發明專利]用于從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法

在審

• 申請號: 202110862417.9
• 申請日: 2021-07-29
• 公開（公告）號: CN113372437A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 瞿歡歡;王佳琛
• 申請（專利權）人: 蘇州博進生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/79
• 分類號: C07K14/79;C07K1/18
• 代理公司: 北京北匯律師事務所 11711
• 代理人: 高元吉

本發明公開一種用于從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法，其包括(a)使新鮮的脫脂牛奶直接通過裝填有陽離子交換填料的層析柱，所述陽離子交換填料具有一定的粒徑和孔徑；(b)用水和含第一濃度鹽的水溶液清洗殘留的牛奶和雜質；(c)用含第二濃度鹽的水溶液或緩沖液以200?1000cm/h的流速洗脫，得到乳鐵蛋白。本發明建立了一種適用于工業級從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法，提取乳鐵蛋白的純度和收率大大提高。此外，本發明的方法避免了使用大型復雜設備，同時通過簡單的提取和純化，實現低成本乳鐵蛋白的提取。

技術領域

本發明涉及蛋白提取和純化領域，具體地涉及提取乳鐵蛋白的方法，尤其是涉及用于從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法。

背景技術

乳鐵蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白，人乳中乳鐵蛋白濃度約為1.0-3.2mg/ml，為嬰幼兒提供多種生物功能，尤其是調節免疫和對病原微生物的抵御功能。對于非母乳喂養的嬰幼兒，動物奶中的乳鐵蛋白含量只有0.02-0.35mg/ml，遠遠低于人乳中乳鐵蛋白的含量，無法滿足嬰幼兒的喂養要求。

基于眾多的研究成果和試驗，在嬰幼兒配方食品中添加乳鐵蛋白具有重要意義，既可滿足嬰兒生長發育的需要，同時又對嬰兒的健康起到保護作用。根據最新的國家標準GB14880將乳鐵蛋白列為營養強化劑。因此，乳鐵蛋白的提取和純化顯得尤為重要。

例如，CN210841449U公開了新型的天然牛奶乳鐵蛋白提取設備，包括固定蓋、反應釜、控制箱、水泵和分離器，固定架內部的底部安裝有控制箱，固定架內部的一側安裝有反應釜，固定蓋的一側設置有安全管，反應釜的底部安裝有水泵，反應釜的一側安裝有分離器，分離器的內部設置有加熱絲，分離器之間安裝有擋板，擋板的底部安裝有氣體管道，螺旋擋板的下方設置有過濾網，分離器的底部安裝有排出口，排出口的底部安裝有連接頭，分離器的頂部安裝有維修頂蓋。該實用新型通過在底部的過濾網采用生物過濾膜可有效的對牛奶當中的乳鐵蛋白進行過濾，從而對乳鐵蛋白進行收集，對于大規模的乳鐵蛋白提取，設備要求相對較高且復雜。

再例如，CN106008703A公開了一種從牛乳中提取與制備高純度低鐵飽和度乳鐵蛋白的方法，其包括如下步驟：第1步，使用陽離子交換樹脂對牛乳中的乳鐵蛋白進行吸附、解附；第2步，對第1步得到的解附液進行濃縮；第3步，第2步得到的濃縮液采用不溶性Fe³⁺螯合樹脂對Fe³⁺進行吸附，再對濃縮液進行濃縮。該方法能夠降低乳鐵蛋白中Fe³⁺離子含量，但是提取量級在工業級生產條件下仍不能滿足提取和純化要求。

基于此，目前仍需一種是適用于工業級的從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法。

發明內容

針對現有技術中存在的至少部分問題，發明人進行了深入研究，發現采用特定的提取步驟，并且通過控制提取過程中的層析條件，從而建立一種適用于工業級從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法，提取乳鐵蛋白的純度和收率大大提高。此外，本發明的方法避免了使用大型復雜設備，同時通過簡單的提取和純化，實現低成本乳鐵蛋白的提取。至少部分地基于該發現完成了本發明。具體地，本發明包括以下內容。

本發明提供一種用于從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法，其至少包括以下步驟：

(a)使新鮮的脫脂牛奶直接通過裝填有陽離子交換填料的層析柱，所述陽離子交換填料的平均粒徑為60-500μm且孔徑為100-500nm；

(b)用水和含第一濃度鹽的水溶液清洗殘留的牛奶和雜質；

(c)用含第二濃度鹽的水溶液或緩沖液以200-1000cm/h的流速洗脫，得到乳鐵蛋白。

根據本發明所述的用于從牛奶中提取乳鐵蛋白的方法，優選地，步驟(a)中，控制層析柱的柱溫在30-60℃的范圍內。