[發明專利]一種利用廢棄腸道內容物進行生物轉化獲得熊去氧膽酸的方法

有效

• 申請號: 202110856688.3
• 申請日: 2021-07-28
• 公開（公告）號: CN113564220B
• 公開（公告）日: 2023-10-17
• 發明（設計）人: 吳慶喜;劉彩霞;王棟;吳志
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P33/00
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 盧敏

本發明公開了一種利用廢棄腸道內容物進行生物轉化獲得熊去氧膽酸的方法，是以鵝去氧膽酸為底物，利用廢棄的動物腸道內容物進行生物轉化，從而獲得熊去氧膽酸。本發明利用廢棄腸道內容物成功催化轉化得到了熊去氧膽酸，使廢棄腸道內容物得到有效利用，為熊去氧膽酸的生物轉化提供了一條新的思路。

技術領域

本發明涉及一種廢棄腸道內容物生物轉化再利用的方法，屬于生物催化轉化領域。

背景技術

近年來，隨著人們生活水平的提高以及科學技術的進步，我國的畜禽養殖業發展迅速，畜禽在屠宰過程中，會產生大量的廢棄腸道內容物，帶來嚴重的環境負荷。此外，據統計，我國每年用于科學實驗的小鼠及大鼠數量多達上億只，宰殺后的廢棄物會造成一系列的環境污染問題。為達到資源利用最大化，踐行綠色可持續發展理念，尋找一種廢棄腸道內容物的再利用技術尤為重要。

膽汁酸在生物體的代謝循環中起著十分重要的作用，初級膽汁酸在肝臟中由膽固醇合成，小部分進入腸道經腸道微生物菌群轉化，形成各種次級膽汁酸。其中，熊去氧膽酸(UDCA)為一種次級膽汁酸，是熊膽中主要成分，具有降壓、利膽、溶解膽結石等功能，在臨床上應用于治療肝膽方面的疾病，具有良好的療效，市場需求旺盛。然而，熊是國家一級保護動物，不能通過殺熊取膽獲取UDCA，因而尋求新的UDCA來源意義重大。

為解決UDCA來源受限問題，可將膽酸通過一定途徑轉化為UDCA，目前獲得UDCA的方法主要包括化學轉化法和生物轉化法，由于化學法在轉化過程中污染嚴重、環境負荷大，因而開發一種新的生物轉化途徑，符合綠色發展理念。生物轉化獲得UDCA主要是利用微生物產生的酶進行催化轉化。其中，初級膽汁酸的羥基氧化是腸道微生物的一種常見轉化為次級膽汁酸的方式。現有技術中應用較多的是利用純菌種在體外將膽酸(CA)和鵝去氧膽酸(CDCA)轉化為UDCA。但是，該方法需要對菌種進行分離、鑒定等，過程復雜。

發明內容

針對上述現狀所存在的問題，本發明提供一種利用廢棄腸道內容物進行生物轉化獲得熊去氧膽酸的方法，旨在簡化現有生物轉化法獲得UDCA的工藝過程。

本發明為實現目的，采用如下技術方案：

一種利用廢棄腸道內容物進行生物轉化獲得熊去氧膽酸的方法，其特點在于：以鵝去氧膽酸CDCA為底物，利用廢棄的動物腸道內容物進行生物轉化，從而獲得熊去氧膽酸UDCA。具體包括如下步驟：

(1)在0-4℃的低溫條件下，收集廢棄的動物腸道內容物；

(2)將CDCA溶解于磷酸鹽緩沖液中；

(3)將步驟(1)中所收集的腸道內容物置于帶蓋Eppendorf管中，加入適量溶有CDCA的磷酸鹽緩沖液并充分混勻，得到生物轉化體系；

(4)將步驟(3)所得的生物轉化體系放入搖床中進行生物轉化，搖床轉速為160-240r/min、溫度為25-35℃、轉化時間為72-120h；

(5)轉化完成后，將生物轉化體系進行離心、取上清液，然后過濾，即得到含UDCA的粗產物水溶液。

進一步地，所述動物腸道內容物為雞、鴨、鵝、小鼠或大鼠的直腸、盲腸或結腸中的內容物。

進一步地，步驟(2)中，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為8.0-10.0、濃度為0.1mol/L。

進一步地，步驟(2)中，CDCA溶解在磷酸鹽緩沖液中的濃度為0.5-2.0mg/mL。

進一步地，步驟(3)中，腸道內容物與溶有CDCA的磷酸鹽緩沖液的體積比為1：2-6。

進一步地，步驟(5)中，所述離心的轉速為8000-12000rpm、時間為20-30min。

進一步地，步驟(5)中，所述過濾是用0.45μm微孔濾膜進行過濾。