[發明專利]一種哺乳動物胚胎的性別鑒定方法在審
| 申請號: | 202110854857.X | 申請日: | 2021-07-28 |
| 公開(公告)號: | CN113584141A | 公開(公告)日: | 2021-11-02 |
| 發明(設計)人: | 高慶華;方翟;陶維昆 | 申請(專利權)人: | 塔里木大學 |
| 主分類號: | C12Q1/6879 | 分類號: | C12Q1/6879;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 孟阿妮;張小勇 |
| 地址: | 843300 新疆維吾爾自治區阿*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 哺乳動物 胚胎 性別 鑒定 方法 | ||
1.一種哺乳動物胚胎的性別鑒定方法,其特征在于,所述的性別鑒定方法包括以下步驟:
(1)獲取胚胎;
(2)獲取胚胎細胞基因組DNA;
(3)設計與合成引物;
(4)QPCR反應:在PCR反應體系中,加入熒光染料;
(5)擴增曲線并分析后,鑒定胚胎性別。
2.根據權利要求1所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的步驟(5)中,擴增曲線后,有雄性特異基因擴增曲線的胚胎為雄性,否則為雌性。
3.根據權利要求1所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的擴增曲線為胚胎DNA擴增曲線、胚胎DNA溶解曲線中的至少一種。
4.根據權利要求1所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的步驟(4)中,QPCR反應的擴增條件為:在95℃下預變性30s后,95℃變性10s,再在65℃退火延伸20s,該過程循環40次。
5.根據權利要求4所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的步驟(4)中,每10μL的PCR反應體系為:2×S6 Universal SYBR qPCR Mix 5μL,上、下游引物各0.25μL,DNA模板1μL,dd H2O 3.5μL。
6.根據權利要求1所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的胚胎為活體采胚、或經體外受精產生的胚胎、或凍胚。
7.根據權利要求1所述的性別鑒定方法,其特征在于,
所述的性別鑒定方法用于鑒定綿羊胚胎。
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