[發明專利]一種耐酸的和繁殖力強的干酪乳桿菌的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202110853088.1
• 申請日: 2021-07-27
• 公開（公告）號: CN113430144B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 李勇;丁婷;陳玉松
• 申請（專利權）人: 陳玉松
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L33/135;C12R1/245
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

本發明公開了一種耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌的制備方法及其應用，屬于微生物技術領域。本發明通過將干酪乳桿菌接種到加入了5’鳥苷酸二鈉的MRS液體培養基中，在30?37℃條件下培養10?48h，獲得耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌。所得的干酪乳桿菌生物被膜的產生及胞外聚合物的分泌增加，增強干酪乳桿菌對外界不利環境的抗性，從而增強細菌的存活率，本發明為提高干酪乳桿菌的存活率提供了一種新思路，并且擴展了干酪乳桿菌在食品和保健食品上的應用。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌的制備方法及其應用。

背景技術

益生菌是通過定殖在人體內，對人體健康有重要作用的活性微生物。研究發現，益生菌在調節腸道菌群平衡、促進營養吸收、保持腸道健康等方面具有重要的作用。但是益生菌在加工銷售過程中以及通過消化道時容易失活，達不到其發揮功能的劑量，因此需要尋找合適的益生元物質來促進其生長繁殖或者增強其抵御外界不良環境的能力。

核苷酸是細胞的重要組成成分，是DNA和RNA的前體，在細胞的代謝、蛋白質合成和細胞分裂等過程中起到重要作用。此外，核苷酸在一些特定條件下，如疾病、快速生長發育、營養攝入受限以及內源性合成和表達受阻時，會使核苷酸成為機體的“必需營養素”。然而，將核苷酸用于制備耐酸的和繁殖能力強的益生菌的相關研究還未見報道。

發明內容

本發明針對上述問題，提供一種耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌的制備方法及其應用。基于群體感應系統研究外源核苷酸對干酪乳桿菌耐酸和繁殖能力的影響，并以干酪乳桿菌的LuxS蛋白為靶點，探究外源核苷酸的作用機制。

本發明為實現上述目的，通過以下技術方案實現：

一種耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌的制備方法，主要包括以下步驟：

(1)將甘油保護劑中保存的干酪乳桿菌接入MRS液體培養基中活化后連續培養2代以上，獲得干酪乳桿菌菌液；

(2)向MRS液體培養基加入5’鳥苷酸二鈉，混合均勻后，接種步驟(1)獲得的干酪乳桿菌菌液，于30-37℃條件下培養10-48h，即得耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌。

進一步地，步驟(1)中所述的活化過程為將保存干酪乳桿菌的冷凍管于30-37℃的水浴鍋中快速溶解，使用75％酒精消毒后，加入到無菌的MRS液體培養基。

進一步地，步驟(1)中所述MRS液體培養基包含有葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母提取物、磷酸氫二鉀、檸檬酸二銨、乙酸鈉。

進一步地，步驟(1)中所述MRS液體培養基的滅菌條件為121℃條件下滅菌15min。

進一步地，步驟(2)中所述MRS液體培養基中的5’鳥苷酸二鈉的濃度為1-4g/100mL。

進一步地，步驟(2)中的接種量為MRS液體培養基體積的1％。

進一步地，步驟(2)中的培養條件為37℃條件下搖床培養，搖床轉速為50-200r/min。

本發明另一方面提供一種上述方法獲得的耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌在食品或保健品中的應用。

進一步地，所述應用包括將所述耐酸的和繁殖能力強的干酪乳桿菌直接或經常規處理后添加到食品或保健品中。

進一步地，所述食品或保健品具有調節腸道菌群平衡、促進營養吸收、保持腸道健康、降血壓、降膽固醇和提高免疫力的作用。

本發明相對于現有技術具有的有益效果如下：