[發(fā)明專利]一種催化活性提高的羧酸還原酶突變體及其編碼基因、基因工程菌以及應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110852740.8
• 申請日: 2021-07-27
• 公開（公告）號: CN113604444B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發(fā)明（設計）人: 王華磊;魏東芝;王留柱
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12N1/21;C12P7/24;C12R1/19
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 余永莉

1.?一種催化活性提高的羧酸還原酶突變體，其特征在于，所述羧酸還原酶突變體為以SEQ?ID?NO.1所示野生型羧酸還原酶MsCAR的第505位氨基酸殘基發(fā)生如下突變后所得突變體的一種：

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝彼酔的羧酸還原酶突變體R505E，氨基酸序列如SEQ?IDNO.2；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楫惲涟彼酙的羧酸還原酶突變體R505I，氨基酸序列如SEQ?IDNO.3；

第505位的精氨酸R突變?yōu)榧琢虬彼酠的羧酸還原酶突變體R505M，氨基酸序列如SEQ?IDNO.4；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝滨０稱的羧酸還原酶突變體R505Q，氨基酸序列如SEQ?IDNO.5。

2.?一種催化活性提高的羧酸還原酶突變體，其特征在于，所述羧酸還原酶突變體為以SEQ?ID?NO.1所示野生型羧酸還原酶MsCAR的第506位氨基酸殘基發(fā)生如下突變后所得突變體：

第506位的天冬酰胺N突變?yōu)橘嚢彼酜的羧酸還原酶突變體N506K，氨基酸序列如SEQ?IDNO.6。

3.?一種催化活性提高的羧酸還原酶突變體，其特征在于，所述羧酸還原酶突變體為以SEQ?ID?NO.1所示野生型羧酸還原酶MsCAR的第505位氨基酸殘基和第506位氨基酸殘基發(fā)生如下突變后所得突變體的一種：

第505位的精氨酸R突變?yōu)楫惲涟彼酙，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)橘嚢彼酜的羧酸還原酶突變體R505I/N506K，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.7；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝彼酕，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)楦拾彼酖的羧酸還原酶突變體R505F/N506G，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.8；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝彼酕，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)楸彼酇的羧酸還原酶突變體R505F/N506A，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.9；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝彼酕，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)榘腚装彼酑的羧酸還原酶突變體R505F/N506C，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.10；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楣劝彼酕，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)槔i氨酸V的羧酸還原酶突變體R505F/N506V，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.11；

第505位的精氨酸R突變?yōu)楫惲涟彼酙，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)榫彼酭的羧酸還原酶突變體R505I/N506R，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.12；

第505位的精氨酸R突變?yōu)橘嚢彼酜，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)榧琢虬彼酠的羧酸還原酶突變體R505K/N506M，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.13；

第505位的精氨酸R突變?yōu)樘K氨酸T，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)榻z氨酸S的羧酸還原酶突變體R505T/N506S，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.14；

第505位的精氨酸R突變?yōu)槔野彼醂，第506位的天門冬酰胺N突變?yōu)楣劝彼酔的羧酸還原酶突變體R505Y/N506E，氨基酸序列如SEQ?ID?NO.15。

4.一種如權利要求1、2和3中任意一項所述的羧酸還原酶突變體的編碼基因。

5.?根據(jù)權利要求4所述的羧酸還原酶突變體的編碼基因，其特征在于，羧酸還原酶突變體R505I的編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.17所示。

6.?根據(jù)權利要求4所述的羧酸還原酶突變體的編碼基因，其特征在于，羧酸還原酶突變體N506K的編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.18所示。

7.?根據(jù)權利要求4所述的羧酸還原酶突變體的編碼基因，其特征在于，羧酸還原酶突變體R505F/N506G的編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.19所示。

8.一種包含權利要求4所述的羧酸還原酶突變體的編碼基因的基因工程菌。