[發明專利]一種杜仲成熟胚離體繁殖的方法

有效

• 申請號: 202110852083.7
• 申請日: 2021-07-27
• 公開（公告）號: CN113475398B
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 李捷;王繼海;李鵬;趙建團;杜碩豐;吳俊;湯永軍;李霞;黃一遠;張翔宇;常珍惜
• 申請（專利權）人: 河南龍源風景園林建設有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;A01G24/15
• 代理公司: 新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 41139
• 代理人: 楊杰

1.一種杜仲成熟胚離體繁殖的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)選取當年生的杜仲成熟種子，清水沖洗3-5遍，消毒，無菌水清洗3-5遍，剝除種皮后，以成熟胚作為外植體，接種到MS培養基上，置于20-24℃，光照強度700-800lx，光照時間14h/d下培養，當長至第一對真葉完全展開時，轉接到1/2MS培養基上進行生根誘導；所述MS培養基由以下成分組成：MS基礎培養基，0.2mg/L6-BA，0.1mg/L NAA，0.5mg/L GA3，3％蔗糖、0.8％瓊脂、pH為5.8-6.0；所述1/2MS培養基由以下成分組成：1/2MS基礎培養基，3％蔗糖、0.8％瓊脂、pH為5.8-6.0；

(2)選取根生長相對較好的組培苗進行馴化移栽，進行正常養護，具體過程為：

①選取根生長相對較好的組培苗，先在組培室打開封口膜放置3-5天；

②栽培土配制：蛭石︰泥炭土進行1:1配置，裝入10cm*10cm營養缽備用；

③挖出組培苗用加多菌靈的清水把培養基清洗干凈，栽入營養缽，澆透水，外罩塑料袋保濕；

④在散光條件下培養5天，進行正常養護；

⑤待苗生長穩定后，施加培養液，培養液的組成為：15％-20％1/2MS溶液，1％白糖，0.05mg/LIBA；

⑥待營養缽基部有根長出，增施1％磷酸二銨溶液，隨后進行正常養護。

2.如權利要求1所述杜仲成熟胚離體繁殖的方法，其特征在于步驟(1)的消毒過程如下：以多菌靈浸泡消毒10min，75％酒精消毒1min，最后0.1％HgCl₂消毒10min。